[发明专利]粘性生物样本液化保存组合产品

说明书

本发明涉及生物样本处理技术领域，具体而言，涉及一种粘性生物样本处理组合产品。该组合产品包含液化组分和保存组分：所述液化组分包括愈创甘油醚和强碱；所述保存组分为包括以下组分的组合物：a)缓冲组分，用于中和所述强碱使保存体系的pH为6～8；b)渗透压调节组分；c)海藻糖、甘露醇以及甘油中的至少一种。本发明能够快速将粘性生物样本进行液化，使样本的粘稠度下降，使得后续操作易于进行，还可以在室温下即可进行，对操作条件要求不苛刻，不影响后续核酸检测，可兼容免提取扩增体系，对液化后的生物样本能够进行长期有效保存。

技术领域

本发明涉及生物样本处理技术领域，具体而言，涉及一种粘性生物样本处理组合产品，特别涉及一种粘性生物样本液化保存组合产品。

背景技术

随着荧光定量PCR以及多重PCR等技术在病原体检测领域的快速发展，通过痰液样本类型检测是否感染相应的病原体种类的需求日益增加。然而痰液样本具有粘度大、蛋白多、成分复杂的特点，包含粘蛋白和其他多种蛋白(如免疫蛋白)、多种酶类、脱落细胞、微生物及其他吸入杂质等，不便于直接检测，临床上痰液样本的检测需要先对痰液进行液化处理。

常见的痰液液化方法为氢氧化钠法、DTT(二硫苏糖醇)法以及蛋白酶法。氢氧化钠法是最常用的痰液液化方法，该方法比较简单，利用主成分为一定浓度的氢氧化钠溶液在60℃～80℃(也可在室温条件下)液化痰液，该方法用于核酸检测时其强碱性环境易造成核酸损失。蛋白酶法的原理是利用蛋白酶消化痰液黏蛋白，该方法的酶解反应耗时较长，所需蛋白酶成本较高，且黏蛋白消化效率低。DTT(二硫苏糖醇)法是目前最常用的痰液液化方法，利用含巯基(-SH)的DTT(二硫苏糖醇)断裂痰液中导致粘稠的主要成分粘蛋白，以PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液)提供生理缓冲，通常还会加入乙醇等固定细胞。该方法耗时长，且使用的DTT(二硫苏糖醇)成本较高，且DTT稳定性差，需要在低温条件下保存，同时DTT存在一定的毒性，不适合临床上大批量处理痰液样本。此外，由于痰液样本粘度大，常规液化处理过程中易产生混合不均的问题。痰液样本中的核酸(尤其是RNA)极不稳定，通常在温室条件下数小时就被降解。然而在临床检测中，往往不能及时处理和检测痰液样本中的核酸，因此发明一种能够快速充分液化痰液同时有效保护样本核酸的方法十分必要。

目前已公开的关于痰液液化及核酸保护的发明较多。然而，这些方法普遍存在成分复杂、成本高、操作复杂、样本混匀及液化不充分等问题，且液化后的样本如何进行有效保存，也是本领域的一个需要解决的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种粘性生物样本液化保存组合产品，其包括液化组分和保存组分：

所述液化组分包括愈创甘油醚和强碱；

所述保存组分包括以下组分：

a)缓冲组分，用于中和所述强碱使保存体系的pH为6～8；

b)渗透压调节组分；和

c)海藻糖、甘露醇以及甘油中的至少一种。

本发明的再一目的在于提供一种试剂盒，其包括如上所述的组合产品。

本发明的再一目的在于提供一种粘性生物样本液化保存方法，包括如下步骤：

i)将粘性生物样本与如上所述的液化组分混合得到第一混合物；

ii)孵育所述第一混合物得到第二混合物；

iii)将所述第二混合物与如上所述的保存组分混合。

本发明的再一目的在于提供一种粘性生物样本中核酸的释放方法，包括如下步骤：

使用如上所述的方法将所述粘性生物样本液化并保存；

使用核酸释放剂释放所述粘性生物样本中的核酸。