[发明专利]分离病毒载体的方法在审

专利信息
申请号: 202111288038.X 申请日: 2021-11-02
公开(公告)号: CN114460219A 公开(公告)日: 2022-05-10
发明(设计)人: K·G·库克;A·B·肖恩;J·U·贝克;S·L·莱尔 申请(专利权)人: 戴安公司
主分类号: G01N30/96 分类号: G01N30/96;G01N30/06
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 陶家蓉;杨昀
地址: 美国加利*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 分离 病毒 载体 方法
【权利要求书】:

1.一种分离含有病毒载体的液体样品的方法,所述方法包括:

a)使所述液体样品流到阴离子交换柱中,其中所述病毒载体包括第一病毒载体和第二病毒载体,所述第一病毒载体含有靶向遗传物质,并且

所述第二病毒载体i)基本上不含遗传物质或ii)含有非靶向遗传物质,其中所述靶向遗传物质不同于所述非靶向遗传物质;

b)使流动相流到所述阴离子交换柱中,其中所述流动相包括第一缓冲溶液A和第二缓冲溶液B的混合物,所述第一缓冲溶液A包括碳酸氢铵和氢氧化铵,所述第二缓冲溶液B包括乙酸和甲酸;

c)将所述第一病毒载体和所述第二病毒载体分离,使得所述第一病毒载体和所述第二病毒载体在不同时间从所述阴离子交换柱洗脱;以及

d)用检测器检测所述第一病毒载体和所述第二病毒载体。

2.根据权利要求1所述的方法,

其中所述第一病毒载体包括被配置成含有所述靶向遗传物质的第一衣壳,并且所述第一衣壳含有所述靶向遗传物质;并且

其中所述第二病毒载体包括被配置成含有所述靶向遗传物质的第二衣壳,并且所述第二衣壳i)基本上不含遗传物质或ii)含有所述非靶向遗传物质。

3.根据权利要求2所述的方法,其中所述靶向遗传物质的至少一部分不同于所述非靶向遗传物质。

4.根据权利要求2所述的方法,其中所述第二衣壳i)基本上不含遗传物质。

5.根据权利要求2所述的方法,其中所述第二衣壳含有ii)所述非靶向遗传物质。

6.根据权利要求3所述的方法,其中与所述靶向遗传物质相比,所述非靶向遗传物质对应于截短的核苷酸序列。

7.根据权利要求2所述的方法,其中所述第一载体具有第一pI,并且所述第二载体具有第二pI,其中所述第一pI和所述第二pI不同,其中所述第一载体和所述第二载体各自包括具有基本上相同的一级蛋白质结构的蛋白质壳体。

8.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一缓冲溶液A和所述第二缓冲溶液B各自仅由溶解在液体中的挥发性缓冲盐组成,其中所述挥发性缓冲盐被配置成在一个大气压下在18℃到120℃的温度范围下形成气体。

9.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一缓冲溶液A和所述第二缓冲溶液B各自不包含溶解在液体中的非挥发性缓冲盐。

10.根据权利要求1所述的方法,其中所述检测器选自由以下组成的组:质谱仪、荧光检测器、紫外可见光分光光度计、多角度光散射分光光度计和其组合。

11.根据权利要求1所述的方法,其中所述阴离子交换柱包括:

基材,所述基材包含乙基乙烯基苯和二乙烯基苯的交联共聚物;

所述基材上由中性亲水聚合物构成的涂层;以及

接枝季铵基团,所述接枝季铵基团连接到所述涂层。

12.根据权利要求1所述的方法,其中所述使所述流动相流到所述阴离子交换柱中包括:

从第一储存器泵出所述第一缓冲溶液A,其中所述第一缓冲溶液A具有第一pH值;

从第二储存器泵出所述第二缓冲溶液B,其中所述第二缓冲溶液B具有第二pH值,其中所述第一pH值和所述第二pH值不同;

将所泵出的第一缓冲溶液A和所泵出的第二缓冲溶液B合并以形成所述第一缓冲溶液A和所述第二缓冲溶液B的所述混合物,之后将所述混合物输入到阴离子交换柱中;以及

随时间的变化针对所合并溶液改变所述第一缓冲溶液A和所述第二缓冲溶液B的比例。

13.根据权利要求12所述的方法,其中所述将所述所泵出的第一缓冲溶液A和所述所泵出的第二缓冲溶液B合并包括:

在使所述所泵出的第一缓冲溶液A和所述所泵出的第二缓冲溶液B流到所述阴离子交换柱之前,在混合器中混合所述所泵出的第一缓冲溶液A和所述所泵出的第二缓冲溶液B。

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