[发明专利]一种葡萄糖氧化酶制备方法

说明书

本发明提供了一种葡萄糖氧化酶制备方法，包括以下步骤：利用金黄色青霉菌进行发酵后获得发酵液；将发酵液去除菌体，获得酶液体；对处于冰浴环境中的酶液体进行盐析后静置；将盐析后静置的酶液体上清液进行提取，并对其进行真空干燥后获得葡萄糖氧化酶；本发明中提供的葡萄糖氧化酶采用优良菌种经液体深层发酵培养，后通过先进的提取工艺精制而成；其催化效率较高，在氧气存在的条件下，能高效的将葡萄糖溶液氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢。本发明所制备的葡萄糖氧化酶具有高度的专一性，不会和其他原料反应，可广泛应用于葡萄糖酸盐的生产。

技术领域

本发明涉及葡萄糖氧化酶制备技术领域，特别涉及一种葡萄糖氧化酶制备方法。

背景技术

葡萄糖氧化酶是食品工业中一种重要的工业用酶，广泛用于葡萄酒、啤酒、果汁、奶粉等食品脱氧、面粉改良、防止食品褐变等方面，在食品快速检测及生物传感器上也有广泛应用。

现有制备方法，其催化效率较低，因此缺少一种能够提高催化效率的方法。

发明内容

本发明提供一种葡萄糖氧化酶制备方法，用以提高催化效率。

本发明提供一种葡萄糖氧化酶制备方法，包括以下步骤：

利用金黄色青霉菌进行发酵后获得发酵液；

将发酵液去除菌体，获得酶液体；

对处于冰浴环境中的酶液体进行盐析后静置；

将盐析后静置的酶液体上清液进行提取，并对其进行真空干燥后获得葡萄糖氧化酶。

优选的，所述将发酵液去除菌体，获得酶液体包括：

所述发酵液的发酵为深层通风发酵，对发酵物进行离心后去除菌体，获得发酵液；

所述离心速度为2600-3800转/分钟，离心作用时间为：8-15分钟。

优选的，所述离心速度为2600转/分钟，离心作用时间为：15 分钟。

优选的，所述离心速度为3500转/分钟，离心作用时间为：10 分钟。

优选的，所述对处于冰浴环境中的酶液体进行盐析后静置包括：对处于冰浴环境中的酶液体加入硫酸铵，并对其进行搅拌后静置；

将酶液体置于冰浴环境下，并依次加入硫酸铵；

其中，所述硫酸铵的添加量以酶液体饱和度的10％递增进行添加，直至所述硫酸铵粉末的饱和度达到100％为止；所述硫酸铵为恒重且颗粒均匀的硫酸铵粉末；

所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌20-40分钟，置于0-6摄氏度环境下静置10-15小时。

优选的，所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌40分钟，置于0-6摄氏度环境下静置12小时；

或者，所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌35分钟，置于0-6摄氏度环境下静置15小时。

优选的，将盐析后静置的酶液体上清液进行提取，并对其进行真空干燥后获得葡萄糖氧化酶还包括：

将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为：10000-15000转/分钟，所述离心环境为4-6摄氏度，所述离心时间为 20-45分钟。

优选的，将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为： 10000转/分钟，所述离心环境为4摄氏度，所述离心时间为35分钟；

或者，将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为： 15000转/分钟，所述离心环境为4摄氏度，所述离心时间为30分钟。