[发明专利]一种葡萄糖氧化酶制备方法

权利要求书

1.一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用金黄色青霉菌进行发酵后获得发酵液；

将发酵液去除菌体，获得酶液体；

对处于冰浴环境中的酶液体进行盐析后静置；

将盐析后静置的酶液体上清液进行提取，并对其进行真空干燥后获得葡萄糖氧化酶。

2.如权利要求1所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，所述将发酵液去除菌体，获得酶液体包括：

所述发酵液的发酵为深层通风发酵，对发酵物进行离心后去除菌体，获得发酵液；

所述离心速度为2600-3800转/分钟，离心作用时间为：8-15分钟。

3.如权利要求2所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，所述离心速度为2600转/分钟，离心作用时间为：15分钟。

4.如权利要求2所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，所述离心速度为3500转/分钟，离心作用时间为：10分钟。

5.如权利要求1所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，所述对处于冰浴环境中的酶液体进行盐析后静置包括：对处于冰浴环境中的酶液体加入硫酸铵，并对其进行搅拌后静置；

将酶液体置于冰浴环境下，并依次加入硫酸铵；

其中，所述硫酸铵的添加量以酶液体饱和度的10％递增进行添加，直至所述硫酸铵粉末的饱和度达到100％为止；所述硫酸铵为恒重且颗粒均匀的硫酸铵粉末；

所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌20-40分钟，置于0-6摄氏度环境下静置10-15小时。

6.如权利要求1所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌40分钟，置于0-6摄氏度环境下静置12小时；

或者，所述硫酸铵粉末和所述酶液体进行搅拌混匀至无颗粒后，继续搅拌35分钟，置于0-6摄氏度环境下静置15小时。

7.如权利要求1所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，将盐析后静置的酶液体上清液进行提取，并对其进行真空干燥后获得葡萄糖氧化酶还包括：

将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为：10000-15000转/分钟，所述离心环境为4-6摄氏度，所述离心时间为20-45分钟。

8.如权利要求1所述的一种葡萄糖氧化酶制备方法，其特征在于，将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为：10000转/分钟，所述离心环境为4摄氏度，所述离心时间为35分钟；

或者，将盐析沉淀后产生的蛋白进行离心，所述离心速度为：15000转/分钟，所述离心环境为4摄氏度，所述离心时间为30分钟。