[发明专利]荷载自噬抑制剂及化疗药物的凝胶因子前体、凝胶材料及制法和应用

权利要求书

1.一种荷载自噬抑制剂及化疗药物的凝胶因子前体，其特征在于，结构如下所示：

2.权利要求1所述的凝胶因子前体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将喜树碱、丁二酸酐和二甲氨基吡啶溶于吡啶溶液中，在氩气保护下室温搅拌反应过夜，然后除去吡啶并加入去离子水，通过冷冻干燥及高效液相色谱纯化后，得到喜树碱丁二酸，记为P₁；

(2)取羟基氯喹硫酸盐溶解到去离子水中，再加入氨水，室温搅拌反应并通过二氯甲烷萃取，得羟基氯喹，记为P₂；

(3)取P₂、丁二酸酐和二甲氨基吡啶溶于吡啶溶液中，在氩气保护下室温搅拌反应过夜，然后除去吡啶并加入去离子水，通过冷冻干燥及高效液相色谱纯化后，得到氯喹丁二酸，记为P₃；

(4)取P₃、二环己基碳二亚胺混合溶解于N,N-二甲基甲酰胺中，加入N-羟基琥珀酰亚胺，在氩气保护下，室温磁力搅拌反应过夜，通过冷冻干燥及高效液相色谱纯化后，得氯喹丁二酸N-羟基琥珀酰亚胺活性酯，记为P₄；

(5)将2-氯三苯甲基氯树脂在N,N-二甲基甲酰胺里溶胀后，加入N-芴甲氧羰基-O-磷酸基-L-酪氨酸，再加入N,N-二异丙基乙胺，反应后用甲醇封端反应，切去酪氨酸的保护基；加入活化的N-芴甲氧羰基-N'-叔丁氧羰基-L-赖氨酸反应，切去赖氨酸的保护基；加入活化的N-芴甲氧羰基-N'-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己亚基)乙基-L-赖氨酸反应，切去赖氨酸的保护基；加入活化的N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸反应时，切去苯丙氨酸的保护基；加入活化的N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸反应，切去苯丙氨酸的保护基；加入活化的2-萘乙酸反应，用水合肼切去赖氨酸侧链的1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己亚基)乙基保护基；加入活化的P₁反应，最后用三氟乙酸的二氯甲烷从树脂上切下合成的肽段，用乙醚使其沉淀析出，冷冻离心并倒掉上层乙醚，乙醚挥发后经过高效液相色谱分离提纯，得到萘乙酸修饰的荷载小分子化疗药物喜树碱的磷酸化多肽序列：萘乙酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸(喜树碱丁二酸)-赖氨酸-酪氨酸-O-磷酸基，记为P₅；

(6)取P₄溶解于N,N-二甲基甲酰胺中，再将P₅和N,N-二异丙基乙胺加入上述溶液中，室温磁力搅拌反应过夜，反应液经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外波长320纳米处有特征吸收的组分，即为凝胶因子前体。

3.根据权利要求2所述的凝胶因子前体的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，所用的氨基酸都是以9-芴甲氧羰基作为α-氨基保护基；所用的赖氨酸侧链氨基由1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己亚基)及叔丁基羰基修饰；所用的酪氨酸的侧链酚羟基由磷酸基修饰；活化氨基酸的试剂是与氨基酸等摩尔量的1-羟基苯并三唑和苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐；切除9-芴甲氧羰基的试剂是体积分数为20％的哌啶。

4.根据权利要求2所述的凝胶因子前体的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中，2-氯三苯甲基氯树脂、N-芴甲氧羰基-O-磷酸基-L-酪氨酸、N-芴甲氧羰基-N'-叔丁氧羰基-L-赖氨酸、N-芴甲氧羰基-N'-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己亚基)乙基-L-赖氨酸、N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸、N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸、1-萘乙酸、P₁的摩尔比为1：2：1.6：1.6：1.6：1.6：1.6：1.6。

5.根据权利要求2所述的凝胶因子前体的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，喜树碱、丁二酸酐和二甲氨基吡啶的摩尔比为2.55：7.65：0.255。

6.根据权利要求2所述的凝胶因子前体的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中，P₄、P₅和N,N-二异丙基乙胺的摩尔比为0.12：0.12：0.24。