[发明专利]一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法

权利要求书

1.一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)、脱脂腰果粉的制备：将生腰果于液氮内粉碎至糊状后进行脱脂、干燥，得脱脂腰果粉；

步骤(2)、腰果粗蛋白的制备：将步骤(1)的脱脂腰果粉于提取液中进行蛋白提取，然后依次经离心、取上清液透析、冷冻干燥，得到粗蛋白冻干粉；

其中，所述提取液采用浓度为10-50mmol/L、pH为7.0-7.4的磷酸盐缓冲液；

步骤(3)、过敏原Ana o 3提纯：将步骤(2)的粗蛋白冻干粉经弱阴离子交换层析，得到高纯度过敏原Ana o 3。

2.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(1)中脱脂、干燥的方法为：将糊状的生腰果加入至沸程为30-60℃的石油醚中脱脂2-6h，然后于4-25℃下离心去除油脂，重复上述脱脂离心操作后，将石油醚于自然条件下风干；

其中，果粉的质量与石油醚的体积比为1g：5-10mL。

3.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(2)中脱脂腰果粉的质量与磷酸盐缓冲液的体积之比为1g：10-20mL。

4.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(2)中蛋白提取的方法为：将步骤(1)的脱脂腰果粉与磷酸盐缓冲液混合均匀，并于4℃条件下磁力搅拌6-12h。

5.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(2)中离心的条件为：于6000-11000r/min、4℃条件下离心10-30min。

6.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(2)中透析的方法为：采用6-8KD的透析袋，于4℃下，于蒸馏水中磁力搅拌透析10-24h。

7.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(3)中弱阴离子交换层析的条件为：于pH为6.8的条件下，采用浓度为0.1-0.5mol/L的氯化钠溶液洗脱，洗脱液流速为2mL/min。

8.根据权利要求1所述的一种从生腰果中制备高纯度致敏原Ana o 3的方法，其特征在于，所述步骤(3)中弱阴离子交换层析采用弱阴离子柱材，其于pH为1-14条件下均结构和活性稳定。