[发明专利]一种野生桑树桑黄菌种分离纯化方法

权利要求书

1.一种野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：在无菌条件下，对桑黄子实体进行表面消毒；

S2：在桑黄子实体上切下菌块，移接到平板培养基上，黑暗条件下培养；

S3：观察桑黄的生长情况，发现有嫩黄色或者深黄色菌丝，通过接种环挑取，在新培养基上采用四区平板划线法分离，继续培养；

S4：出现杂菌时进行判断，当杂菌影响桑黄菌的生长，重复S3步骤；当杂菌不影响桑黄菌的生长，在无菌条件下将杂菌去除，直至得到纯化桑黄菌；

S2步骤中，平板培养基的组分配比为马铃薯滤液80-180ml、麦芽糖15-30g、蛋白胨0.5-3g、硫酸镁0.5-3g、磷酸二氢钾1-5g、VB10.005-0.025g、琼脂10-20g、桑枝及桑叶过滤水0.5-1.5L、pH为6.1-6.3。

2.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述S2过程中，使用酒精擦拭并灼烧的解剖刀，冷却后在桑黄子实体上切去长宽高为1cm*1cm*1cm，尺寸大小上下浮动20％。

3.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述S2过程中，在平板培养基上的培养条件为温度20-25℃，湿度50-60％；第一天倒置平板培养基培养，第一天之后正放平板培养基培养。

4.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述S4过程中，当出现粘液状圆形、粘液状类圆形菌团或菌丝分布在平板培养基边缘，未污染桑黄菌块时，用刀无菌操作将菌团或菌丝切除。

5.根据权利要求1或所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述S4过程中，当出现杂菌菌丝，且桑黄菌生长速度不及杂菌时，重复S3步骤。

6.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述S4过程中，纯化桑黄菌的判定方法为：菌落颜色呈嫩黄色、菌丝呈星射状生长，有光泽。

7.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述平板培养基中，马铃薯滤液的获取方法为：马铃薯沸水煮25-35分钟，使用6层纱布过滤2-4次得到的滤液。

8.根据权利要求1所述的野生桑树桑黄菌种分离纯化方法，其特征在于，所述平板培养基中，桑枝及桑叶过滤水的获取方法为：将桑枝及桑叶粉碎，加入至水中，然后煮水25-35分钟过滤得到。