[发明专利]S100A4蛋白在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄诊断中的应用

说明书

本发明属于医学生物学技术领域，尤其涉及S100A4在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄诊断中的应用。本发明通过在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄患者的外周血单个核细胞中发现外周血单个核细胞中S100A4的表达明显上调。同时还发现S100A4的基因表达水平与血浆中S100A4的蛋白表达水平存在相关关系，差异具有统计学意义，提示S100A4作为动脉粥样硬化性肾动脉狭窄诊断分子标记物的可行性并且可以达到对动脉粥样硬化性肾动脉狭窄无创诊断，具有重大临床应用价值。

技术领域

本发明属于医学生物学技术领域，尤其涉及S100A4在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄诊断中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化性肾动脉狭窄是继发性高血压和肾功能衰竭的主要原因，近7%的老年人存在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄(60%管腔闭塞)，大多数肾动脉狭窄由动脉粥样硬化所致，形成不同程度的动脉粥样斑块及钙化，常常会使肾动脉成锥形或偏心狭窄，单侧或双侧肾动脉主干或主要分支狭窄超过50%即可诊断为肾动脉狭窄。动脉粥样硬化性肾动脉狭窄发病机制不清，但由于动脉粥样硬化造成的肾动脉管腔的狭窄，影响肾脏的供血功能，激活RAAS系统，引起机体的内分泌系统调节紊乱导致心脏的左室重构、血压增高和血管重塑等一系列的病理生理的改变。肾动脉狭窄往往发病症状不典型，多合并继发性高血压、缺血性肾病、终末期肾病后到医院就诊方能确定原发疾病的诊断。随机前瞻性试验研究发现无论是药物治疗还是微创介入治疗，无论是加强治疗还是充分控制血压治疗，肾脏和肾外并发症并不少见。然而，动脉粥样硬化性肾动脉狭窄精确机制、准确检测和最佳治疗仍然是未知的。以早期检测和针对这些致病途径的防治策略的研究可能会阻止临床终点事件的发展，故对动脉粥样硬化性肾动脉狭窄检测和针对这些致病途径的策略是我们亟待解决的问题。

S100蛋白是一种低分子质量的酸性蛋白，目前其家族成员主要有21个，S100蛋白家族的总体特征是其属于细胞类型特异性表达蛋白质，S100蛋白存在2个EF手的钙离子结合蛋白结合区域，S100家族成员因其具有不同的钙离子蛋白与不同的受体蛋白结合发挥不同的亲和能力，在细胞内和细胞间发挥不同的生物学作用。S100A4为S100家族成员的成纤维样的特殊蛋白，S100A4位于1号染色体长臂2区1带，由3个exon和1个intron组成，含有101个氨基酸，分子量为11.5KD。同S100家族的其它成员一样，S100A4也具有EF手型的钙离子结合特征结构，S100A4通过与特异性的钙离子结合后，空间构象发生变化，暴露S100A4配体与受体结合的部位，S100A4与特异性的受体结合后，发生炎症信号的级联放大效应，诱导和促进肿瘤转移，参与了肝脏、肺脏的纤维化、炎症和自身免疫性疾病的病理生理过程。S100A4在细胞内主要参与靶细胞的凋亡、迁移，S100A4的外泌可以促进中性粒细胞、单核巨噬细胞等炎症细胞表达和分泌细胞因子、生长因子、趋化因子及细胞外的基质金属蛋白酶，刺激促炎相关通路的激活，外泌的S100A4主要具有促炎、促转移的活性。

因此，研发在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄发病检测敏感性及特异性生化标志物是动脉粥样硬化性肾动脉狭窄防治亟待解决的重要的问题。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种动脉粥样硬化性肾动脉狭窄临床诊断分子标志物S100A4在制备诊断动脉粥样硬化性肾动脉狭窄的试剂或试剂盒中的应用。本发现所提供的标志物具有高灵敏度和高特异性的特点并研制成相应的辅助诊断试剂或试剂盒，具有重大的临床意义。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案。

本发明提供了一种S100A4基因或其编码蛋白作为生物标志物在制备诊断动脉粥样硬化性肾动脉狭窄的试剂盒中的应用。

进一步地，所述试剂盒通过逆转录PCR、实时定量PCR或蛋白免疫检测试剂盒检测样本中S100A4基因或其编码蛋白的表达水平。

更进一步地，所述逆转录PCR和/或实时定量PCR检测试剂盒包括SEQ ID NO .3-SEQ ID NO .4所示的扩增S100A4基因的引物。