[发明专利]J亚型禽白血病病毒gp85基因的RT-RAA荧光法检测引物对、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 202111237942.8 | 申请日: | 2021-10-25 |
公开(公告)号: | CN113930546A | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
发明(设计)人: | 谢青梅;张新珩;巫秀红;陈丽怡;姚梓淇 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 苏士莹 |
地址: | 510642 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 亚型禽 白血病病毒 gp85 基因 rt raa 荧光 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种J亚型禽白血病病毒gp85基因的RT-RAA荧光法检测引物对,其特征在于,所述引物对包括正向引物和反向引物;所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述引物对在制备检测J亚型禽白血病病毒的试剂或试剂盒中的应用。
3.一种检测J亚型禽白血病病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物对。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括针对J亚型禽白血病病毒gp85基因设计的探针。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述探针包括核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示的探针。
6.根据权利要求3~5任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品;
所述阳性对照品包括含有J亚型禽白血病病毒SCAU1903的核酸;所述阴性对照品包括ddH2O。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照品的扩增碱基序列如SEQID NO.4所示。
8.一种非诊断目的的检测J亚型禽白血病病毒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
提取待测样本的RNA,以待测样本的RNA为模板,利用3~7任一项所述的试剂盒进行RT-RAA反应;
结果判定:若出峰时间≤19.5min或Ct值≤39,则待测样本为J亚型禽白血病病毒阳性阳性;若出峰时间>19.5min或Ct值>39,则待测样本为J亚型禽白血病病毒阳性阴性。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述RT-RAA的反应温度为41℃,反应时间为20~30min。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述试剂盒中的引物对的正向引物和反向引物的工作浓度均为10μmol/L;所述试剂盒中的探针的工作浓度为10μmol/L。
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