[发明专利]一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用有效
| 申请号: | 202111200077.X | 申请日: | 2021-10-14 |
| 公开(公告)号: | CN113981008B | 公开(公告)日: | 2023-09-22 |
| 发明(设计)人: | 张婷婷;贺莹莹;张敏;赵宇苗;张学尧;霍艳君;张建珍 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
| 主分类号: | C12N15/89 | 分类号: | C12N15/89;C12N9/22;A01K67/033 |
| 代理公司: | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 程园园 |
| 地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 制备 飞蝗 lmzen 突变体 方法 rnp 复合物 应用 | ||
1.一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)构建Lmzen基因敲除RNP复合物,其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件:T7启动子,Lmzen基因靶点和tracRNA-crRNA所转录而成的RNA;Cas9蛋白;ddH2O;所述Lmzen基因是指飞蝗zerknüllt基因;所述LmZen基因靶点的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
2)将步骤1)所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵,孵化,得G0代,将G0代与野生型杂交得G1代;
3)将步骤2)所述G1代自交,获得的G2代,即为飞蝗Lmzen纯合突变体。
2.如权利要求1所述方法,其特征在于,所述的共转是将所述RNP复合物显微注射新鲜飞蝗卵。
3.一种Lmzen基因敲除RNP复合物,其特征在于,其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件:T7启动子,Lmzen基因靶点和tracRNA-crRNA所转录而成的RNA;Cas9蛋白;ddH2O;所述Lmzen基因是指飞蝗zerknüllt基因;所述LmZen基因靶点的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。
4.一种防治飞蝗的方法,其特征在于,包括以下步骤:将如权利要求1所述的方法制备而得的纯合突变体野外放生,通过与野生飞蝗交配,使后代减少,降低种群数量。
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