[发明专利]TCR及其在诊断/治疗中的应用

说明书

本发明提供了TCR及其在诊断/治疗中的应用，所述TCR包括α链和β链中的至少一者，本发明还提供了包含编码所述TCR的多核苷酸、载体、细胞以及组合物。

技术领域

本发明属于细胞免疫学、基因工程领域，涉及TCR及其在诊断/治疗中的应用。

背景技术

细胞免疫治疗是当前肿瘤生物治疗的研究热点。细胞恶性转化是由于肿瘤发生相关基因的突变造成，包括癌基因的激活，抑癌基因的失活及基因调控的改变等。基因突变造成蛋白异常表达，异常表达的蛋白作为肿瘤抗原能够被免疫系统的细胞识别，因此肿瘤的发生和进展过程是肿瘤细胞和免疫系统相互作用的过程。免疫系统的效应细胞能够识别肿瘤抗原，通过直接杀伤肿瘤细胞或分泌细胞因子，控制肿瘤的发生和进展。虽然肿瘤的最终发生意味着肿瘤细胞已经通过各种途径逃避了免疫系统的作用，但是大量的实验证明免疫系统的抗肿瘤机制可以被激活利用，控制肿瘤的进展。单克隆抗体在肿瘤治疗领域的价值已经显现，多个抗体类药物如曲妥珠、西妥昔单抗和贝伐单抗等在乳腺癌和结肠癌中已成功应用。免疫细胞，尤其T细胞，能够识别特异性抗原，主动的浸入组织，精确识别和杀伤肿瘤细胞，因此细胞免疫治疗更受到肿瘤免疫治疗领域的关注与期望。

肿瘤特异T细胞过继细胞治疗(adoptive cell therapy,ACT)是肿瘤免疫治疗的最新进展[3]。细胞免疫尤其是CD8+T细胞介导的特异性MHC-I类分子限制性细胞免疫功能在抗肿瘤免疫中起决定作用。T淋巴细胞通过特异性T细胞受体(Tcell receptor,TCR)识别肿瘤细胞表面抗原肽-MHC复合物而被激活。活化的T胞可以直接溶解肿瘤细胞，或通过分泌细胞因子，如干扰素和肿瘤坏死因子，抑制肿瘤生长，阻止肿瘤血管生成。应用现代免疫学技术，可以将自体肿瘤特异性T细胞进行体外扩增，再回输给肿瘤患者进行治疗。当前技术的进展已经能够在体外扩增过程中维持T细胞的特异性和功能，然后回输到患者体内用于治疗。但由于大多数肿瘤抗原是自体抗原，不仅表达于肿瘤组织，通过体外诱导获得的多克隆T细胞对抗原的亲和力很低。同时，肿瘤在发生过程中己诱导机体产生了一定程度的免疫耐受，患者体内的肿瘤特异性T细胞比例很低，上述方法难以诱导足够数量的T细胞，限制了其应用。

分子生物学技术的进步使制备转基因T细胞成为可能，可以克隆特异的TCR基因并导入多克隆T细胞。研究高效、低毒及可操控的TCR-T细胞免疫法在肿瘤治疗中具有理想的应用前景。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提供了分离的结合蛋白(T细胞受体，TCR)以及与该受体相关的核酸、重组表达载体、宿主细胞或工程化细胞。本发明还提供了用于治疗或预防肿瘤和/或癌症、或用于检测宿主的肿瘤和/或癌症的包含T细胞受体的药物组合物。本发明提供的T细胞受体及其相关的产品具有较好的杀伤效果。

本发明提供了如下内容：

本发明第一方面提供了一种结合蛋白，包括：

(a)TCRα链可变结构域Vα，该结构域具有SEQ ID NO:3所示的CDR3氨基酸序列，或SEQ ID NO：3所示的以多达五个氨基酸替代、插入和/或删除的CDR3氨基酸序列，以及TCRβ链可变结构域Vβ；

(b)Vα结构域，和Vβ结构域，该Vβ结构域具有SEQ ID NO:9-11中任一个所示的CDR3氨基酸序列，或SEQ ID NO:9-11中任一个所示的以多达五个氨基酸替代、插入和/或删除的CDR3氨基酸序列；或

(c)(a)的Vα结构域和(b)的Vβ结构域。

进一步，所述Vα结构域包括SEQ ID NO:3的CDR3氨基酸序列，所述Vβ结构域包括SEQ ID NO:9的CDR3氨基酸序列；或

所述Vα结构域包括SEQ ID NO:3的CDR3氨基酸序列，所述Vβ结构域包括SEQ IDNO:10的CDR3氨基酸序列；或