[发明专利]一种羊骨钙结合肽的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：原料预处理；剔除羊骨上的肉及筋膜等，将羊骨破碎成3-6cm羊骨块，用热水反复清洗；

步骤二：高压蒸煮；将清洗好的羊骨块，置于高压蒸煮锅中，加入超纯水，于100-130℃，蒸煮30-60min；

步骤三：羊骨粉的制备；将高压蒸煮后的羊骨反复用热水清洗去表面油脂，置于烘风干燥箱中，于65-85℃下干燥6-8h，结束后将羊骨粉碎，过80-200目筛，得到羊骨粉；

步骤四：羊骨粉脱脂；取羊骨粉，按重量8-15倍的比例添加脱脂剂，在恒温磁力搅拌器中，80-200r/min匀速旋转脱脂18-36h，然后静置2-4h，去除无水乙醇，置于烘风干燥箱，4-6h干燥得脱脂羊骨粉；

步骤五：酶解；在脱脂羊骨粉中加入中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶中的一种或任意两种的复合蛋白酶中进行酶解，加酶量为底物重量浓度的2％-6％，酶解时间为3-6h，酶解温度为40-60℃，酶解后90-100℃灭酶10-20min，得到羊骨蛋白酶解液；

步骤六：离心；将羊骨蛋白酶解液于低温高速离心机中离心分离，取上清液即为羊骨多肽液；

步骤七：超滤

将所述羊骨多肽液经过不同分子量大小的超滤膜进行分离，得到不同分子量大小的多肽液，将其冷冻干燥即得羊骨多肽粉。

2.根据权利要求1所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，在所述步骤二：高压蒸煮中，超纯水的加入量是羊骨重量的2-5倍。

3.根据权利要求1所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，所述步骤四：所述脱脂剂为无水乙醇，每隔4-6h更换一次脱脂剂。

4.根据权利要求1所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，在所述步骤五：酶解中，碱性蛋白酶的酶活力20万U/g，pH为8-10；中性蛋白酶的酶活力6万U/g，pH为6-8；风味蛋白酶的酶活力3万U/g，pH为6-8。

5.根据权利要求1所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，在所述步骤七：超滤中，将羊骨多肽液通过分别通过超滤管过滤，收集3-10KDa的滤液。

6.根据权利要求1所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺，其特征在于，在所述步骤七：超滤中，冷冻干燥选择分段干燥，第一段：-35℃，3-5h；第二段：-25℃，3-5h；第三段，-10℃，3-5h；第四段，0℃，3-5h；第五段，5℃，4-6h；第六段，15℃，4-6h；第七段，20℃，2-4h；第八段，25℃，3-5h；设置第二段为抽真空段，第八段为恒温段。

7.根据权利要求1-6任一所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺制备所得羊骨钙结合肽的应用，用于普通食品。

8.根据权利要求1-6任一所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺制备所得羊骨钙结合肽的应用，用于保健品。

9.根据权利要求1-6任一所述一种羊骨钙结合肽的制备工艺制备所得羊骨钙结合肽的应用，用于医药。