[发明专利]一种用于饲用添加剂的丁酸梭菌及其应用

权利要求书

1.一种用于饲用添加剂的丁酸梭菌及其应用，其特征在于：所述丁酸梭菌，保藏号CGMCC No.22880，保藏于北京微生物菌种保藏中心。

2.根据权利要求1所述的一种用于饲用添加剂的丁酸梭菌及其应用，其特征在于：所述菌株在发酵过程中种子液的接种量2％～10％(V/V)接入发酵培养基中，温度25℃～42℃，发酵20h～60h。

3.根据权利要求1所述的一种用于饲用添加剂的丁酸梭菌及其应用，其特征在于：所述丁酸梭菌的冷冻干燥益生菌剂的菌落数在108～109cfu/g。

4.根据权利要求1所述的一种用于饲用添加剂的丁酸梭菌及其应用，其特征在于：所述包括如下步骤，

(1)菌株平板、液体培养

丁酸梭菌RCM固体培养基：胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉3g，氯化钠5g，葡萄糖4g，无水乙酸钠3g，可溶性淀粉1g，L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，琼脂20g，加蒸馏水至1000mL，pH 7.2±0.1，121℃灭菌20分钟；

丁酸梭菌RCM液体培养基：胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉3g，氯化钠5g，葡萄糖4g，无水乙酸钠3g，可溶性淀粉1g，L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，加蒸馏水至1000mL，pH 7.2±0.1，121℃灭菌20分钟；

所述丁酸梭菌，首先用固体培养基进行平板培养，接着用液体培养基进行摇瓶培养，接着按照6％(V/V)接种量接入液体培养基作为一级种子液，然后按照6％(V/V)接种量接入液体培养基作为二级种子液；

(2)发酵培养基：可溶性淀粉5～10g/L，玉米粉20～30g/L，百香果皮10～20g/L，硫酸锰0.01～0.1g/L，硫酸镁0.1～0.5g/L，酵母粉10～20g/L，磷酸氢二钾0.1～1g/L，FeSO4 1～2g/L米粉废水替代水作为液体补充，混合搅拌，110℃灭菌20分钟。

(3)丁酸梭菌发酵工艺

将步骤(1)种子液培养后的丁酸梭菌采用比浊法调整浓度，然后按照接种量2％～10％(V/V)接入步骤(2)中制备的发酵培养基中，温度25℃～42℃，发酵24h～60h；

(4)对发酵产物进行分离，上清为有机酸混合液，沉淀为菌体，在菌体中添加保护剂后进行冷冻干燥，即得饲料添加剂成品。