[发明专利]基于TaHDA9-D基因中A2173T SNP位点鉴定小麦每穗小穗数的方法在审
申请号: | 202111184362.7 | 申请日: | 2021-10-11 |
公开(公告)号: | CN115961065A | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 郑术芝;赵伟双;白蛟腾;谢洪莲 | 申请(专利权)人: | 河北师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 闫书宁 |
地址: | 050024 河北省石家庄市*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 tahda9 基因 a2173t snp 鉴定 小麦 小穗 方法 | ||
1.一种筛选或辅助筛选不同每穗小穗数小麦的方法,包括如下步骤:检测待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型I还是基因型II,基因型I小麦的每穗小穗数基因型II小麦的每穗小穗数;
所述基因型I的小麦为基于A2173T SNP位点的基因型为AA纯合型的小麦;
所述基因型II的小麦为基于A2173T SNP位点的基因型为TT纯合型的小麦;
所述A2173T SNP位点为小麦基因组中SEQ ID NO:1自5’末端起的第2173位核苷酸。
2.一种筛选或辅助筛选不同每穗小穗数小麦的方法,依次包括如下步骤:
(A1)以待测小麦的基因组DNA为模板,采用引物F1和引物R1组成的引物对甲进行PCR扩增,得到PCR扩增产物P1;
(A2)以所述PCR扩增产物P1为模板,采用引物F2和引物R2组成的引物对乙进行PCR扩增,得到PCR扩增产物P2;
(A3)将所述PCR扩增产物P2用限制性内切酶BglII进行酶切,得到酶切产物;然后进行如下评判:如果所述酶切产物为一条DNA片段,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型I;如果所述酶切产物为两条DNA片段,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型II;
基因型I的小麦的每穗小穗数基因型II的小麦的每穗小穗数;
所述引物F1为SEQ ID NO:4所示的单链DNA分子;
所述引物R1为SEQ ID NO:5所示的单链DNA分子;
所述引物F2为SEQ ID NO:6所示的单链DNA分子;
所述引物R2为SEQ ID NO:7所示的单链DNA分子。
3.一种筛选或辅助筛选不同每穗小穗数小麦的方法,依次包括如下步骤:
(B1)以待测小麦的基因组DNA为模板,采用引物F1和引物R1组成的引物对甲进行PCR扩增,得到PCR扩增产物P1;
(B2)以所述PCR扩增产物P1为模板,采用引物F2和引物R2组成的引物对乙进行PCR扩增,得到PCR扩增产物P2;
(B3)将所述PCR扩增产物P2用限制性内切酶BglII进行酶切,得到酶切产物;然后进行如下评判:如果所述酶切产物中只具有100bp的DNA片段,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型I;如果所述酶切产物中只具有79bp的DNA片段和21bp的DNA片段,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型II;
基因型I的小麦的每穗小穗数基因型II的小麦的每穗小穗数;
所述引物F1为SEQ ID NO:4所示的单链DNA分子;
所述引物R1为SEQ ID NO:5所示的单链DNA分子;
所述引物F2为SEQ ID NO:6所示的单链DNA分子;
所述引物R2为SEQ ID NO:7所示的单链DNA分子。
4.一种筛选或辅助筛选不同每穗小穗数小麦的方法,依次包括如下步骤:
(C1)以待测小麦的基因组DNA为模板,采用引物F1和引物R1组成的引物对甲进行PCR扩增,得到PCR扩增产物P1;
所述引物F1为SEQ ID NO:4所示的单链DNA分子;
所述引物R1为SEQ ID NO:5所示的单链DNA分子;
(C2)将所述PCR扩增产物P1进行测序,然后进行如下评判:
如果所述PCR扩增产物P1的核苷酸序列如SEQ ID NO:2自5’末端起第1777-2577位所示,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型I;
如果所述PCR扩增产物P1的核苷酸序列如SEQ ID NO:3自5’末端起第1777-2577位所示,则待测小麦基于TaHDA9-D基因的基因型为基因型II;
基因型I的小麦的每穗小穗数基因型II的小麦的每穗小穗数。
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