[发明专利]一种从高粘度发酵液中提取普鲁兰多糖的工艺

权利要求书

1.一种从高粘度发酵液中提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

（1）去除发酵液中菌体：用HCl溶液调整高粘度发酵液的pH值3~5，加入冰乙酸溶解的壳聚糖、保温、静置、离心去除菌体和不溶物，制得絮凝除菌体；

（2）去除蛋白质：将去除菌体和不溶物后的絮凝除菌体，用NaOH溶液调整发酵液pH8~9，静置、离心，取上清液加入碱性蛋白酶，加热保温，灭酶，离心去除蛋白质；

（3）脱色处理：步骤（2）得到的发酵液用HCl溶液调整发酵液的pH值3~5,向其中加入大孔树脂，加热保温搅拌，进行色素的去除，然后过滤回收大孔树脂；

（4）超滤膜组去除离子:将步骤（3）得到的发酵液，通过超滤膜组件进行超滤除盐，反复循环超滤，至普鲁兰多糖浓度达5~8g/100mL；

（5）干燥、粉碎、包装。

2.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，所述高粘度发酵液的粘度为200~350mpa·s；加热温度30~50℃，静置10~30min，离心转速为4000~5000rpm后回收菌体蛋白；所述壳聚糖用1%冰乙酸溶解，按质量体积比计，所述发酵液中壳聚糖的含量为0.6~1.0g/L。

3.根据权利要求2所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，所述壳聚糖经1%冰乙酸溶解，配置成浓度为0.8~1g/100mL的壳聚糖溶液时，粘度为20~30mpa·s，脱乙酰度为85~95%。

4.根据权利要求2所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，所述高粘度发酵液粘度为200~250mpa·s时，加入的壳聚糖在高粘度发酵液中的含量为0.6~1.0g/L，加热温度30~50℃，静置20~30min絮凝除菌体，回收菌体蛋白。

5.根据权利要求2所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，步骤（1）中高粘度发酵液粘度为250~350mpa·s时，加入的壳聚糖在高粘度发酵液中的含量为0.8~1.0g/L，加热温度40~50℃，静置20min絮凝除菌体，回收菌体蛋白。

6.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，步骤（2）中，碱性蛋白酶的添加量为80~100U/mL；采用NaOH溶液为6~10mol/L，静置15~30min，离心转速为转速4000~5000rpm，保温40~50℃，2~3小时，85~95℃灭酶1-5min，离心转速为4000~5000rpm。

7.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，步骤（3）中的脱色处理还可以为动态树脂吸附，包括以下步骤：步骤（2）得到的发酵液用HCl溶液调整发酵液的pH值3~5,控制流速5~15BV/h，上柱体积为10~15BV，通过大孔树脂交换柱，收集滤出液，采用动态吸附的树脂的添加量为每100mL发酵液添加3~10g吸附树脂。

8.根据权利要求7所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，所述的大孔树脂的型号为LX~68M。

9.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，提取过程各步骤中，步骤（1）和步骤（3）中调整pH所用的HCl浓度为4~7mol/L；步骤（3）中加热保温时搅拌转速180~220rpm，吸附处理1~3h。

10.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，步骤（4）中通过截留分子量为1000~10000Da的超滤膜组件进行组合超滤除盐，操作压力为0.20~0.40Mpa,向发酵液中加入0.5~1.0倍体积的蒸馏水，循环进行超滤，反复进行6~8次，至溶液按葡萄糖计，单糖、二糖和寡糖质量含量小于10%，且溶液电导率为50~300μs/cm，且普鲁兰多糖浓度达5~8g/100mL。

11.根据权利要求1所述的提取普鲁兰多糖的工艺，其特征在于，步骤（5）中的干燥步骤为：将步骤（4）中的普鲁兰多糖溶液旋蒸浓缩至多糖含量为10~20g/100mL，铺成0.2~1.2mm厚，进行真空干燥至恒重。