[发明专利]一种新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的定量分析方法在审
| 申请号: | 202111171612.3 | 申请日: | 2021-10-08 |
| 公开(公告)号: | CN113917022A | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
| 发明(设计)人: | 杨兴烨;卜海之;文家杰 | 申请(专利权)人: | 苏州圣苏新药开发有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 215000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 新型 组蛋白 乙酰化 抑制剂 定量分析 方法 | ||
1.一种新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的定量分析方法,其特征在于,包括步骤:
S1.制备样品:通过蛋白沉淀法对血浆做前处理,得到含新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的有机溶剂混合液;其中,所述蛋白沉淀法包括步骤:S11.取适量人血浆,加入内标溶液;S12.再加入有机溶剂剧烈涡旋后离心;S13.取上清液稀释后进样分析柱中
S2.定量分析:用液相色谱串联三重四级杆质谱仪进行质谱分析。
2.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S11中,人血浆用量为50μL,内标为西达本胺,加入内标溶液为含西达本胺的乙腈溶液。
3.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S12中,所述有机溶剂为乙腈。
4.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S13中,上清液稀释使用的溶液为纯水。
5.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,液相色谱条件:色谱柱为Agilent XDB-C18 3.5μm,2.1×50mm;柱温40℃;进样器温度4℃;流动相A为含0.1%甲酸的5mM醋酸胺水溶液,B为含0.1%甲酸的乙腈;梯度洗脱(0-0.5min,流动相B为30%;0.5-1.5min,流动相B由30%升高到95%;1.5-2min,流动相B为95%;2.1-3.5min,流动相B为30%);流速为0.5mL/min,进样量5μL,分析时间3.5分钟。
6.根据权利要求5所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,质谱仪的型号为Sciex5500或更高型号,质谱条件:离子化模式为ESI+;喷雾电压为5500V;温度为550℃;雾化器GS1为50psi;辅助雾化气GS2为50psi;气帘气为30psi;扫描方式为多反应检测MRM。
7.根据权利要求6所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,标准曲线中新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的浓度范围为1~1000ng/mL。
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