[发明专利]一种新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的定量分析方法在审

专利信息
申请号: 202111171612.3 申请日: 2021-10-08
公开(公告)号: CN113917022A 公开(公告)日: 2022-01-11
发明(设计)人: 杨兴烨;卜海之;文家杰 申请(专利权)人: 苏州圣苏新药开发有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 215000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 新型 组蛋白 乙酰化 抑制剂 定量分析 方法
【权利要求书】:

1.一种新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的定量分析方法,其特征在于,包括步骤:

S1.制备样品:通过蛋白沉淀法对血浆做前处理,得到含新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的有机溶剂混合液;其中,所述蛋白沉淀法包括步骤:S11.取适量人血浆,加入内标溶液;S12.再加入有机溶剂剧烈涡旋后离心;S13.取上清液稀释后进样分析柱中

S2.定量分析:用液相色谱串联三重四级杆质谱仪进行质谱分析。

2.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S11中,人血浆用量为50μL,内标为西达本胺,加入内标溶液为含西达本胺的乙腈溶液。

3.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S12中,所述有机溶剂为乙腈。

4.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,所述蛋白沉淀法的步骤S13中,上清液稀释使用的溶液为纯水。

5.根据权利要求1所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,液相色谱条件:色谱柱为Agilent XDB-C18 3.5μm,2.1×50mm;柱温40℃;进样器温度4℃;流动相A为含0.1%甲酸的5mM醋酸胺水溶液,B为含0.1%甲酸的乙腈;梯度洗脱(0-0.5min,流动相B为30%;0.5-1.5min,流动相B由30%升高到95%;1.5-2min,流动相B为95%;2.1-3.5min,流动相B为30%);流速为0.5mL/min,进样量5μL,分析时间3.5分钟。

6.根据权利要求5所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,质谱仪的型号为Sciex5500或更高型号,质谱条件:离子化模式为ESI+;喷雾电压为5500V;温度为550℃;雾化器GS1为50psi;辅助雾化气GS2为50psi;气帘气为30psi;扫描方式为多反应检测MRM。

7.根据权利要求6所述的定量分析方法,其特征在于,步骤S2中,标准曲线中新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的浓度范围为1~1000ng/mL。

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