[发明专利]一种人血浆中紫杉醇的定量分析方法

权利要求书

1.一种人血浆中紫杉醇的定量分析方法，所述方法采用固相萃取技术对血浆样品中的紫杉醇进行富集，并联合液相色谱串联质谱进行检测，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1.通过固相萃取法前处理血浆样品并富集血样中紫杉醇：取待测血样，加入酸溶液进行酸化，并加入内标溶液，混匀后通过固相萃取装置，经过多步淋洗后用含甲酸有机溶剂洗脱，得到含紫杉醇的洗脱液，并经过氮气吹干后使用有机溶剂混合液复溶后进样；

S2.使用液相色谱串联质谱进行分析，计算紫杉醇与内标峰面积比值，并通过内标法建立标准曲线计算人血浆样品中的紫杉醇浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中：所述血样为血浆，体积为100μL；所述酸溶液为含1％甲酸的水溶液；所述固相萃取装置的填料为HLB-C18；固相萃取方式为96孔固相萃取样品板；所述内标溶液为含有内标多西他赛的50％甲醇溶液，所述多步淋洗包括含1％甲酸的水溶液和含0.1％甲酸的50％甲醇溶液；所述含甲酸有机溶剂为含0.1％甲酸的甲醇溶液；所述有机溶剂混合液为含0.1％甲酸的40％乙腈溶液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S2中，液相色谱条件：色谱柱为WatersXTERRA MS C18 5μm，2.1×50mm；柱温40℃；进样器温度4℃；流动相A为含0.1％甲酸的水，流动相B为含0.1％甲酸的乙腈；梯度洗脱为：0-0.5min，流动相B为40％；0.5-2.2min，流动相B由40％升高到65％；2.2-2.21min，流动相B由65％升高到95％；2.21-2.7min，流动相B为95％；2.71-3.5min，流动相B为40％；流速为0.6mL/min，进样量5μL。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤S2中，质谱条件：离子化模式为ESI+；喷雾电压为4500V；温度为500℃；雾化器GS1为50psi；辅助雾化气GS2为50psi；气帘气为40psi；扫描方式为多反应检测MRM；紫杉醇及内标的具体参数如下表：

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S2中，紫杉醇的线性浓度范围为1-1000ng/mL。