[发明专利]一种定坤丹的特征图谱及其构建方法、应用

权利要求书

1.一种定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，其包括以下步骤：将定坤丹待测液经高效液相色谱法梯度洗脱分离，即可；

所述液相色谱法中，色谱条件如下：

色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；

检测波长为260~280nm；

以甲醇为流动相A，以0.05~0.5%甲酸为流动相B，百分比是指体积百分比；

以所述流动相的总体积为100%计，所述梯度洗脱分离的程序如下表所示：

                                                       ；

所述定坤丹待测液的制备，其包括下述步骤：将定坤丹经50%甲醇溶解并超声制得。

2.如权利要求1所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，色谱柱为InertsilODS-3C18。

3.如权利要求1或2所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法满足下述条件中的一种或多种：

①所述高效液相色谱法的柱温为25~30℃；

②所述色谱柱的内径为4.6 mm；

③所述色谱柱的柱长为250mm；

④所述色谱柱的填料粒径为5μm；

⑤所述检测波长为260nm；

⑥所述流动相的流速为0.9~1.1ml/min；

⑦所述流动相B为0.2%甲酸；和

所述高效液相色谱法中，进样量为5~10μl。

4.如权利要求3所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法满足下述条件中的一种或多种：

①所述高效液相色谱法的柱温为25℃；

②所述流动相的流速为1ml/min；和

③所述高效液相色谱法中，进样量为5μl。

5.如权利要求1或2所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述的定坤丹特征图谱的构建方法还包括以下步骤：

对照品溶液制备，其中所述对照品为阿魏酸。

6.如权利要求1所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述定坤丹待测液的制备满足下述条件中的一种或多种：

①所述定坤丹的质量g和所述甲醇的体积ml之比为4:（20~40）；

②所述超声的时间为20~40分钟；

③所述超声的功率为500W；和

④所述超声的频率为40KHz。

7.如权利要求6所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述定坤丹的质量g和所述甲醇的体积ml之比为4:30；

和/或，所述超声的时间为30分钟。

8.如权利要求5所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液为阿魏酸的甲醇溶液。

9.如权利要求8所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液中阿魏酸的浓度为15μg/mL。

10.如权利要求6-9中任一项所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述定坤丹特征图谱的构建方法还包括以下步骤：

将所述定坤丹待测液和对照品溶液注入高效液相色谱仪；

采用国家药典委员会制定的中药色谱特征图谱相似度评价软件，对所述定坤丹待测液和所述对照品溶液的高效液相色谱图谱进行数据匹配，得到标准特征图谱。

11.如权利要求1或2所述的定坤丹特征图谱的构建方法，其特征在于，所述定坤丹的特征图谱中包括9个共有峰，其中5号峰为阿魏酸，7号峰为西红花苷-Ⅰ，8号峰为藁本内酯。