[发明专利]七种虾类实时鉴定的原位快速蒸发电离质谱法

说明书

本发明公开了一种七种虾类实时鉴定的原位快速蒸发电离质谱法，包括以下步骤，a、获取七种虾，每种虾分成若干份；b、得到七种、每种若干份的虾肌肉，纯净水洗净；c、每份虾肌肉分别均质，得到七种、若干个虾滑样本；d、REIMS分析：形成七组、每组若干个REIMS光谱，并经MassLynx软件采集；e、数据分析与统计：计算每组REIMS光谱中的各个质谱数据变量的平均值和标准偏差；在无监督主成分分析和监督正交偏最小二乘判别分析的基础上，确定出七种虾之间的差异变量离子，f、根据差异变量离子建立比对模型，鉴别出虾产品的原料虾种类。本发明具有能对市场上最常见的七种虾类进行实时鉴定的优点，并且重复性好、可靠性好。

技术领域

本发明属于虾类鉴定领域，尤其涉及一种七种虾类实时鉴定的原位快速蒸发电离质谱法。

背景技术

海鲜是一种日常食品，是优质蛋白质和其他功能成分的重要来源。虾属于节肢动物门，甲壳纲亚门，十足目，因其美味和高营养价值而成为受欢迎的海鲜之一。虾的热量和饱和脂肪含量低，蛋白质、n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)、B族维生素、铁和磷脂含量高。世界各地有各种来源和营养价值不同的虾，它们以生虾、冷冻或加工虾产品销售。泰国斑节对虾(Penaeus monodon，TBT)、哈氏仿对虾(Parapenaeopsis hardwickii，PSH)、太平洋白虾(Litopenaeus Vannamei,LSV)、刀额新对虾(Metapenaeusensis，MNS)、中国对虾(PSC)、日本对虾(PSJ)和红虾(Solenocera crassicornis，SAC)是市场中最常见的七种虾品种。

由于对优质海产品的需求不断增加以及市场和贸易的全球化，复杂形式的水产品欺诈行为广泛发生。通常情况下，大多数虾的种类可以通过完整的身体外观来识别。然而，在去除硬壳和头部后，消费者在视觉上难以区分品种，当虾被加工成虾滑时，这种困难变得更具挑战性。虾产品欺诈通常是通过用更便宜的替代高价值物种，以及为了经济利益而故意贴错地理来源标签来实施的。因此，迫切需要一种快速、准确、可靠的虾品种鉴定分析方法，减少虾产品欺诈行为的产生。

鉴别海产品种类的常用方法是检测基于DNA的生物标志物，例如多重实时定量聚合酶链反应(PCR)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)等。然而，对于基因型方法，当DNA污染或分析物复杂时，鉴别精度会不稳定。最近，脂质组学方法已被证明是监测掺假和识别不同物种的有效工具，这是由于每个生物物种的脂质特征，与基因型方法相比，更便宜、更准确。脂质组学的程序是通过应用现代分析方法检测脂质来进行的。比如可以根据脂质含量的不同，建立了超高效液相色谱-三重飞行时间串联质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)来区分多种虾类，比如可以通过亲水相互作用色谱/质谱(HILIC/MS)检测到的虹鳟鱼和两种鲑鱼的脂质组学指纹具有差异性。此外，多种技术已成功用于分析脂质标志物，例如气相色谱/质谱(GC/MS)、核磁共振(NMR)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)等。然而，对于上述脂质组学方法，样品制备、分析程序和统计步骤始终是劳动密集型和耗时的。

原位快速蒸发电离质谱(REIMS)是新开发的环境电离质谱技术，可以实现基于实时脂质组学特征的生物组织鉴别，无需样品预处理和色谱分离。通过电刀“iKnife”将细胞生物质置于射频交流电中，从而导致局部焦耳加热和细胞破裂以及带电和中性粒子的解吸，从而获得质谱信号。整个REIMS分析通常只需要几秒钟。目前，REIMS方法以其出色的检测性能在食品科学技术领域得到了成功的应用，例如，用于区分以不同模式培养的中华鳖，用于区分食品级肉产品，但目前上还不能通过REIMS对虾类实现实时鉴定。

因此，需要一种能对市场上最常见的七种虾类进行实时鉴定的原位快速蒸发电离质谱法。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种七种虾类实时鉴定的原位快速蒸发电离质谱法。本发明具有能对市场上最常见的七种虾类进行实时鉴定的优点，并且重复性好、可靠性好。