[发明专利]一种透析液中神经递质的检测方法在审
申请号: | 202111120095.7 | 申请日: | 2021-09-24 |
公开(公告)号: | CN113866299A | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
发明(设计)人: | 潘凌云;姜珊;贾益群;王宇;刘新华;王雨 | 申请(专利权)人: | 上海中医药大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/08;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 霍苗 |
地址: | 201203 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 透析 神经 检测 方法 | ||
1.一种透析液中神经递质的检测方法,包括以下步骤:
将待测透析液进行富集,得到富集样品;
对所述富集样品进行超高效液相色谱-质谱检测;
所述超高效液相色谱-质谱检测包括超高效液相色谱检测和质谱检测;
所述超高效液相色谱检测的参数包括:
色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,2.1mm×100mm,1.7μm;
流动相A:甲酸铵水溶液;
流动相B:乙腈;
梯度洗脱程序:
(1)体积比例为2~5%乙腈等度洗脱11.5~12.5min;
(2)乙腈的体积比例匀速升至65~75%梯度洗脱2.5~3.5min;
(3)体积比例为65~75%乙腈等度洗脱1.0~2.0min;
(4)体积比例为65~75%乙腈瞬时切换为体积比例为2~5%乙腈后等度洗脱1.0~2.0min;
流动相的流速:0.2~0.3mL/min;
柱温:30~45℃;
所述质谱检测的参数包括:
离子源为电喷雾离子源,扫描模式为正或负离子模式;离子源喷雾电压:4.0~4.5kV;离子源气帘气:193.0~275.8kPa;碰撞气:41.4~55.1kPa;离子源温度:400~600℃;雾化气:344.7~413.7kPa;辅助气:344.7~413.7kPa;分析时间:8.0~10min;多反应监测模式。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述富集为定量环富集;所述定量环的规格为5μL~20μL。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述定量环为具有十通阀的定量环。
4.根据权利要求1或2或3所述的检测方法,其特征在于,所述富集的时间为2.5min~20min。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,当神经递质为谷氨酸时,监测离子对为148.1/84.1;当神经递质为天冬氨酸时,监测离子对为134.1/74.0;当神经递质为5-羟色胺时,监测离子对为177.2/160.3;当神经递质为组胺时,监测离子对为112.0/95.1;当神经递质为乙酰胆碱时,监测离子对为146.3/87.0;当神经递质为甘氨酸时,监测离子对为76.2/30.0;当神经递质为5-羟吲哚乙酸时,监测离子对为192.1/146.1;当神经递质为谷氨酰胺时,监测离子对为147.1/130.1;当神经递质为γ-氨基丁酸时,监测离子对为104.1/87.2;当神经递质为腺苷时,监测离子对为268.4/136.5;以上10种神经递质采用正离子模式监测;
当神经递质为单磷酸腺苷时,监测离子对为268.4/136.5;当神经递质为二磷酸腺苷时,监测离子对为426.2/133.8;当神经递质为三磷酸腺苷时,监测离子对为505.9/158.9;以上3种神经递质采用负离子模式监测。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述待测透析液的稀释剂为林格氏液。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述超高效液相色谱-质谱检测包括定量检测;所述定量检测采用标准曲线法;所述标准曲线法中的标准曲线为神经递质浓度和色谱峰面积的标准曲线。
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