[发明专利]一种vGPCR蛋白靶向肽的筛选方法及其嵌合毒素与应用

权利要求书

1.一种vGPCR蛋白靶向肽的筛选方法，其特征在于，所述靶向肽筛选方法包括利用表达和不表达靶蛋白的细胞多轮交替筛选，具体步骤包括：

步骤1、慢病毒包装及稳定细胞系构建；

步骤2、噬菌体库的筛选；

步骤3、His-vGPCR及vGPCR1-51-Fc蛋白纯化；

步骤4、结合vGPCR蛋白短肽的单克隆候选噬菌体的筛选。

2.如权利要求1所述vGPCR蛋白靶向肽的筛选方法，其特征在于，所述步骤3采取四轮噬菌体淘选，淘选条件如下：

第1轮至第3轮淘选采用表达目标蛋白的vGPCR-GFP/HEK293T细胞系，第4轮采用不表达目标蛋白的GFP/HEK293T细胞系，5％BSA封闭时间依次是15min、30min、45min和60min，噬菌体原始库与封闭后的细胞悬液结合时间依次是60min、45min、30min和60min。

3.权利要求1所述的vGPCR蛋白靶向肽的衍生物在以vGPCR为靶点的检测试剂中的应用。

4.权利要求1所述的vGPCR蛋白靶向肽的衍生物在KSHV相关肿瘤诊断或治疗中的应用。

5.一种靶向vGPCR的嵌合毒素，其特征在于，包括权利要求1所述的靶向肽、连接肽和裂解肽，该嵌合毒素氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

6.权利要求5所述的靶向vGPCR的嵌合毒素作为制备KSHV相关肿瘤靶向药物的应用。