[发明专利]一种同源靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒及其制备方法和抗肿瘤的应用

说明书

本发明公开了一种同源靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒及其制备方法和抗肿瘤的应用。所述的靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒，包括纳米颗粒内核、纳米颗粒内核外部包裹的单宁酸和铜的配合物以及具有靶向能力的癌细胞膜，所述纳米颗粒内核由白蛋白以及吸附于白蛋白上的葡萄糖氧化酶构成。本发明的制备方法主要采用超声方式，操作简单、重复性好、尺寸可控。所述纳米材料具有同源靶向性，单宁酸铜配合物能和过氧化氢发生芬顿样反应，产生羟基自由基能有效杀死癌细胞。此外，在葡萄糖氧化酶的共同作用下增加癌细胞微环境的过氧化氢的含量进一步提高芬顿样反应的作用；且单宁酸铜配合物在超声的激发下能产生ROS，具有协同杀伤肿瘤细胞的作用。

技术领域

本发明属于抗肿瘤药物领域，具体涉及同源靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒及其制备方法和肿瘤治疗方面的应用。

背景技术

恶性肿瘤的发病率逐年升高，严重威胁了人类的生命健康，是导致70岁之前死亡的第一原因。传统的肿瘤的治疗方法主要以手术切除为主，化疗和放疗为辅。但是恶性肿瘤常呈浸润性生长，手术只能切除边界清晰地实体瘤，对于浸润式生长的瘤体难以全部精确切除干净，而化疗药物的肿瘤通常靶向性不佳，而放疗是基于全身的治疗手段，这种缺乏特异性的治疗方式在抑制肿瘤组织生长的同时对正常组织也造成了不可逆转的损伤，但依然无法阻止恶性肿瘤生长、复发并转移。因此，开发新型特异性和高效低毒的癌症治疗方式去减少化疗药物的毒副作用，增强治疗效果，是近年来肿瘤治疗的研究热点。

近年来，芬顿样反应在抗肿瘤治疗研究中显示出强大的抗肿瘤治疗效果。它是利用金属作为催化剂，使肿瘤内的二氧化氢转化为高活性的羟基自由基，诱导肿瘤细胞发生严重的氧化损伤从而抑制肿瘤组织的发展。单宁酸(TA)是一种高分子量的多酚，它含有五个双烯丙基酯基团共价连接在中心葡萄糖核上，它的邻苯二酚和没食子酚为金属螯合提供了结合位点，它可以作为金属离子配位的多齿配体，因此含有没食子酰基的TA可以和铜离子形成高度稳定的金属配合物，为后续的芬顿样反应提供充足的金属离子。

近年来，声动力肿瘤治疗方式由于其非侵入和时空可控的优势而被广泛研究。声动力治疗(SDT)是依赖超声波和声敏剂使氧气变为具有细胞毒性的活性氧(ROS)，导致肿瘤细胞的死亡，消融肿瘤病灶。超声波具有强的组织穿透性，可以穿透10cm的组织，其深的穿透特性使其成为肿瘤治疗领域的研究热点。因此，声动力治疗在深层的恶性瘤中具有重大意义。

针对肿瘤部位短时间产生充足的ROS从而达到有效地杀灭肿瘤的目标，目前研究中面临着肿瘤部位ROS产量不足以及对正常组织损伤较大的问题，因此，严重限制了其在抗肿瘤研究领域的应用。研究证明，肿瘤组织具有特殊的酸性、缺氧和氧化还原微环境，主要表现为：pH较低(pH 5.5-6.5)和较高的过氧化氢含量。如何利用肿瘤细胞的特性实现靶向治疗是亟需解决的问题。

发明内容

本发明公开了同源靶向多功能纳米颗粒的制备方法，旨在提供一种制备简单、尺寸可控、性质稳定的肿瘤靶向多功能纳米颗粒，解决纳米颗粒肿瘤靶向性和肿瘤微环境过氧化氢含量不足的问题。同时，本发明还提供了一种单宁酸铜配合物在抗肿瘤中的应用。在超声激发下，同源靶向单宁酸铜人血清白蛋白复合纳米颗粒具有杀伤肿瘤细胞的作用，可作为声敏剂应用于声动力抗肿瘤。

本发明一个方面提供了一种靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒，其包括纳米颗粒内核、纳米颗粒内核外部包裹的单宁酸和铜的配合物以及具有靶向能力的癌细胞膜，所述纳米颗粒内核由白蛋白以及吸附于白蛋白上的葡萄糖氧化酶构成。

在本发明的技术方案中，所述的同源靶向单宁酸铜白蛋白复合纳米颗粒通过以下方法制成，

1)将白蛋白与葡萄糖氧化酶在水溶液中混合，加入有机溶剂后分散均匀，然后去除有机溶剂获得纳米颗粒内核；

2)将步骤1)获得的纳米颗粒内核分散在碱性水溶液中清洗后，加入单宁酸和铜盐，并混合均匀，得到包裹单宁酸和铜的配合物的纳米颗粒；