[发明专利]一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法

说明书

一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，属于发酵技术领域。所述方法为：首先将深海菌活化，菌株经过固态筛选配方和发酵条件筛选后，得到最佳发酵条件后，进行发酵，切块后用乙酸乙酯萃取后获得抗菌剂。本发明相比于现有技术的有益效果为：本发明完成了抗菌剂的发酵，生产效率高，而且废渣可以重复当复合肥进行利用，使得废料不会被浪费，而且得到的抗菌剂产量高，适合大量推广使用。

技术领域

本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法。

背景技术

深海菌的次级代谢产物种类丰富，骨架结构新颖多样，生物学活性显著，是发现药物先导化合物的重要来源。不恰当和不合理地使用抗生素已导致对抗菌素耐药性的发展与增加，出现全球性威胁。近年来世界各地出现多种“超级细菌”，它们对大多数抗生素都产生耐药性，给临床上病原菌感染等疾病的治疗带来巨大的挑战，从海洋放线菌中分离出新的次生代谢物具有巨大的潜力。而现有技术发酵手段发酵效率低下，产量低，环境污染大，非常不实用，因此需要一种新的发酵工艺提高抗菌剂产能。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有放线菌发酵效率低下、产量低等问题，提供一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，所述方法为：将深海菌活化，菌株经过固态筛选配方和发酵条件筛选后，得到最佳发酵条件后，进行发酵，切块后用乙酸乙酯萃取后旋蒸获得微生物菌剂。

进一步地，所述方法包括以下步骤：

S1：准备需要筛选含培养基的种子瓶，利用高压蒸汽对种子瓶进行灭菌0.5h，灭菌完成后，将上述培养基均匀铺板，冷却后将深海菌涂布到平板上，发酵后用乙酸乙酯浸提3次，每次24小时，得到抗菌剂；所述培养基包括ISP1培养基、LB培养基、waksman培养基、Thronton培养基、TSB培养基、高氏一号培养基、甘露糖大豆培养基、蔗糖大豆培养基、葡萄糖酵母粉培养基；

S2：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别配置五种pH值的培养基，其分别为6、6.5、7、7.5和8，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S3：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别发酵3、5、7、9和11天，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S4：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以26℃、28℃、30℃和32℃发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S5：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以选取Nacl、MgSO₄、FeSO₄和K₂HPO₄筛选无机盐发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S6：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以0.5％、1.5％、2.5％、3.5％和4.5％的接种量发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标。

本发明相比于现有技术的有益效果为：本发明完成了抗菌剂的发酵，生产效率高，而且废渣可以重复当复合肥进行利用，使得废料不会被浪费，而且得到的抗菌剂产量高，适合大量推广使用。

具体实施方式

下面将结合本发明，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

为了便于理解本发明，下面对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。