[发明专利]一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法

权利要求书

1.一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述方法为：将深海菌活化，菌株经过固态筛选配方和发酵条件筛选后，得到最佳发酵条件后，进行发酵，切块后用乙酸乙酯萃取后旋蒸获得微生物菌剂。

2.根据权利要求1所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

S1：准备需要筛选含培养基的种子瓶，利用高压蒸汽对种子瓶进行灭菌0.5h，灭菌完成后，将上述培养基均匀铺板，冷却后将深海菌涂布到平板上，发酵后用乙酸乙酯浸提3次，每次24小时，得到抗菌剂；所述培养基包括ISP1培养基、LB培养基、waksman培养基、Thronton培养基、TSB培养基、高氏一号培养基、甘露糖大豆培养基、蔗糖大豆培养基、葡萄糖酵母粉培养基；

S2：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别配置五种pH值的培养基，其分别为6、6.5、7、7.5和8，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S3：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别发酵3、5、7、9和11天，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S4：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以26℃、28℃、30℃和32℃发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S5：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以选取Nacl、MgSO₄、FeSO₄和K₂HPO₄筛选无机盐发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标；

S6：用S1步骤筛选得到的培养基配方，分别以0.5％、1.5％、2.5％、3.5％和4.5％的接种量发酵培养，用抑制金黄色葡萄球菌的抑菌圈作为评价指标。

3.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S1～S6中，蒸汽温度为121℃，压强为0.103MPa-0.168MPa。

4.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S2～S5中，所加入的菌液的体积为培养基的体积1.5％。

5.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S2中，用于测量种子罐pH值的工具为进口精密pH计、精密PH试纸或常规PH计。

6.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S1、S2、S3、S5和S6中，温度为28℃。

7.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S1～S6中，需要对平板做镜检，需要检验菌体的形态和生长状况。

8.根据权利要求2所述的一种基于深海菌的定向筛选的抗菌剂的发酵方法，其特征在于：所述步骤S1、S3～S6中，pH调至7.5左右。