[发明专利]一种智脑胶囊指纹图谱建立方法及质量评价方法

说明书

一种智脑胶囊指纹图谱建立方法及质量评价方法，属于复方中药制剂品控管理技术领域，取智脑胶囊内容物适量，加甲醇超声提取，过滤膜过滤；精密称取对照品加甲醇配置成一定浓度对照品溶液；流动相选择乙腈‑水，采用梯度洗脱；检测器选择DAD，色谱柱选择BEH C₁₈；测定获得10批样品UPLC图谱，将获得的UPLC图谱导入相似度评价软件中，计算样品相似度，并确定标准指纹图谱；以相似度大于0.90则符合智脑胶囊质量要求，从而完成对待测智脑胶囊样品的质量评价。本发明利用超高效液相色谱法构建了智脑胶囊的指纹图谱，并对多批次智脑胶囊进行分析确定了其标准指纹图谱，建立一种稳定可靠的智脑胶囊质量控制方法。

技术领域

本发明属于复方中药制剂品控管理技术领域，具体是涉及一种智脑胶囊指纹图谱建立方法及质量评价方法。

背景技术

目前，中药指纹图谱技术主要包括薄层扫描(TLCS)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和高效毛细管电泳法(HPCE)等色谱法，以及紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)、核磁共振法(NMR)和X—射线衍射法等光谱法。其中，色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认的三种常规分析手段。由于高效液相色谱法(HPLC)具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点，而且中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。

智脑胶囊为安徽中医药大学第一附属医院的医院制剂。该制剂处方以其不同剂型应用于临床治疗阿尔茨海默症超过20余年，疗效确切。该制剂处方主要由党参、黄芪、黄精、肉苁蓉、郁金、石菖蒲、川芎和地龙八味中药组成，主要功效为健脾益肾、豁痰化瘀、开窍健脑。目前，该制剂的主要质量控制方法是对制剂中的黄芪、石菖蒲为对照药材，采用薄层色谱法进行鉴别，以HPLC法测定制剂中松果菊苷含量。但是，目前这种质量控制方法手段较为单一，不能全面控制和反应该制剂的质量。

本发明主要采用UPLC分析技术，建立智脑胶囊的指纹图谱，较全面控制制剂的质量。该方法目前相关文献报道。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种智脑胶囊指纹图谱建立方法及质量评价方法，采用UPLC技术建立智脑胶囊的指纹图谱，较全面控制制剂的质量，为制定制剂的全面和专属性质量控制指标提供依据，也为该制剂质量的提升、进一步发挥临床疗效以及为新药开发提供支持。

本发明所采用的技术方案为：一种智脑胶囊指纹图谱建立方法，步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：

取1g智脑胶囊内容物，加甲醇定容至10ml，超声提取15min，以12000r/min转速离心，取滤液以0.22μm过滤膜过滤，得到供试品溶液；

(2)对照品溶液制备：

精密称取对照品槲皮素、毛蕊异黄酮、党参炔苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷一定量，加甲醇配置成槲皮素0.3mg/ml，毛蕊异黄酮0.3mg/ml，党参炔苷0.981mg/ml，松果菊苷0.519mg/ml，毛蕊花糖苷0.586mg/ml的对照品溶液；

(3)色谱条件：

流动相选择乙腈(A)-水(B)，采用梯度洗脱，条件设置为：0-5min，97％B；5-9min，80％B；9-12min，65％B；12-13min，65％B；13-14min，50％B；14-18min，45％B；18-19min，45％B；19-20min，0％B；20-22min，97％B；22min后停止；

检测器选择DAD，检测波长为260nm；柱温为30.0℃；流速为0.2ml/min；进样量为2μL；色谱柱选择ACQUITY UPLC BEH C₁₈；

(4)指纹图谱建立：