[发明专利]用于识别、富集和/或扩增抗原特异性T细胞的试剂和方法

权利要求书

1.一种用于识别T细胞库的T细胞抗原或组分的方法，

其包含：

提供包含自受试者分离的T细胞的样品，

针对顺磁性粒子的库筛选所述分离的T细胞，每个顺磁性粒子的表面上包含MHC肽抗原呈递复合物和淋巴细胞共刺激配体，其中所述粒子直径为约10nm到约500nm，其中每个粒子呈递候选肽抗原，

通过将所述粒子与所述样品在磁场存在下培育，磁性活化所述样品中对所述候选肽抗原具有特异性的T细胞，

将与所述顺磁性粒子缔合的细胞从不与所述顺磁性粒子缔合的细胞分离，以及

识别引起所述受试者的T细胞的活化的一种或多种候选肽抗原，其中所述受试者的T细胞的活化通过测量指示T细胞活化的细胞因子表达或胞内信号传递来识别。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者为癌症患者。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述候选肽包含根据所述患者的癌症的基因分析预测的肽抗原。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述受试者的T细胞的活化通过细胞因子表达来识别，所述细胞因子表达通过免疫化学或RT-PCR来测量。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，进一步包括，在将与所述顺磁性粒子缔合的细胞从不与所述顺磁性粒子缔合的细胞分离后，培养与所述顺磁性粒子缔合的细胞。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述粒子与所述样品在磁性塔上的培育为15分钟至5小时。

7.根据权利要求6所述的方法，其中将与所述顺磁性粒子缔合的T细胞与所述顺磁性粒子一起培养，并且在培养15至48小时内定量细胞因子表达。

8.根据权利要求7所述的方法，其中将与所述顺磁性粒子缔合的T细胞与所述顺磁性粒子一起培养，并且在培养15分钟至5小时后定量胞内信号传递。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所选择的肽抗原负载到人工抗原呈递细胞上。

10.根据权利要求9所述的方法，进一步包括离体富集和扩增辨别被识别为引起T细胞活化的肽抗原的T细胞的步骤。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者怀疑患有免疫疾病，并且所述顺磁性粒子呈递指示自体免疫和/或免疫疾病的候选肽的库。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者怀疑患有传染病，并且所述顺磁性粒子呈递指示传染病的候选肽的库。

13.根据权利要求10所述的方法，其中富集辨别被识别为引起T细胞活化的肽抗原的T细胞的步骤包括以下方法：

提供来自患者或合适供体的包含T细胞的样品；以及

通过密度梯度离心或流式细胞测量术回收抗原特异性T细胞。