[发明专利]一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物及其应用在审
| 申请号： | 202111078824.7 | 申请日： | 2021-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN115807070A | 公开（公告）日： | 2023-03-17 |
| 发明（设计）人： | 逄宇;梁晨;李姗姗;张福真;唐神结;高孟秋 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京胸科医院;北京市结核病胸部肿瘤研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6881 | 分类号： | C12Q1/6881;G01N33/569;C12N5/0783;C12Q1/02;A61K45/00;A61P31/06 |
| 代理公司： | 北京象合知识产权代理事务所(普通合伙) 11893 | 代理人： | 封明艳;郑慧娟 |
| 地址： | 101149 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 结核 分枝杆菌 记忆 nk 细胞 标志 及其 应用 | ||
1.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物，其特征在于：所述的标志物为CRTAM受体。
2.根据权利要求1所述的一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物，其特征在于：所述的CRTAM基因在再次接受结核特异性抗原刺激后高表达。
3.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物的应用，其特征在于：所述的标志物用于结核特异性记忆样NK细胞的筛查。
4.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物的应用，其特征在于：所述的标志物用于抗结核有关的药物研发和/或疗效研究。
5.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物的应用，其特征在于：所述的标志物用于CRTAM的检测试剂盒。
6.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物的应用方法，其特征在于：所述的方法为通过检测TB患者外周血PBMCs在Mtb抗原再次刺激下NK细胞CRTAM的mRNA转录水平和/或蛋白质表达水平对活化的结核特异性记忆样NK细胞进行筛选。
7.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物的使用方法，其特征在于，所述的方法包括：
(1)取外周血10ml，置于含EDTA抗凝剂的采血管中，利用TBD人全血单个核细胞分离液进行PBMCs分离；
(2)得到的PBMCs铺入12孔细胞培养板，每孔加入2×106个细胞；
提前3～4周接种培养Mtb标准株H37Rv，收集生长对数期的Mtb离心，PBS清洗2遍，加入PBS重悬，超声裂解后离心收集上清过滤；
设置刺激时间为24h，Mtb裂解物蛋白浓度为10μg/ml，刺激结束后利用流式分析IFN-γ+NK细胞数量。
8.一种结核分枝杆菌记忆样NK细胞筛查的标志物用于特异性靶向CRTAM基因的免疫治疗研究。
9.外周血液中记忆样NK细胞在制备筛查机体免疫能力的物质中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其中所述感染性疾病为结核病，所述物质包括外周血中PBMCs的分离试剂。
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