[发明专利]西洋参环介导等温扩增引物组及鉴定方法在审
| 申请号： | 202111078810.5 | 申请日： | 2021-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN115807114A | 公开（公告）日： | 2023-03-17 |
| 发明（设计）人： | 刘丽梅;范馨元;王雪松;周亭亭;王添琦;惠赫童;郭佳宁 | 申请（专利权）人： | 北华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11 |
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| 地址： | 132013 吉林省吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 西洋参 环介导 等温 扩增 引物 鉴定 方法 | ||
1.西洋参环介导等温扩增(LAMP)检测引物组,其特征在于:所述引物组包括FIP、BIP、F3、B3，其中:
FIP：5’-GGCGATGATGATCATCAGATATTGCTTGATGACTTTATGGAAGGTG-3’
BIP：5’-ATTGGTACTGATCAAGGTCAAGACAGGAAAGCCAGTAATGCTTGTGCT-3’
F3：5’-GGTTTGAAGAACAGAGAAGAGA-3’
B3：5’-ACTTACCAAAGTGACAGCT-3’
2.一种如权利要求1所述的LAMP引物组在西洋参环介导等温扩增检测方法中的应用。
3.一种西洋参环介导等温扩增检测方法,其特征在于:所述环介导等温扩增方法还包括LAMP反应液。
4.根据权利要求3所述的西洋参环介导等温扩增检测方法,其特征在于:所述LAMP反应液包括2×LAMP Master Mix缓冲液、BstDNA聚合酶。
5.根据权利要求4所述的西洋参环介导等温扩增检测方法,其特征在于,所述LAMP检测引物组、LAMP反应液和显色试剂所构建的环介导等温扩增反应体系含有:FIP引物2μL(10μM)、BIP引物2μL(10μM)、F3引物1μL(2.5μM)、B3引物1μL(2.5μM)、2×LAMP Master Mix缓冲液12.5μL、西洋参模板2μL(50ng/μL)、BstDNA聚合酶0.5μL(8U/μL)、100000×GelRed染料0.2μL(用于琼脂糖凝胶电泳检测)或20×Eva Green1μL荧光染料(用于实时荧光曲线检测)、加超纯水至25μL。
6.一种西洋参环介导等温扩增检测方法,其特征在于:步骤如下:待检样品核酸的提取、环介导等温扩增及产物检测。
7.根据权利要求6所述的LAMP检测方法,其特征在于,所述环介导等温扩增的条件为:65℃恒温扩增60分钟，通过可视化检测，琼脂糖凝胶电泳和实时荧光曲线(RT-LAMP)来实现西洋参的检测。
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