[发明专利]基于甘油酯的脂质纳米颗粒制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了基于甘油酯的脂质纳米颗粒制剂及其制备方法和应用。一种脂质纳米颗粒制剂，包含由本发明所述的无荷载纳米脂质包封至少一种核酸分子形成的脂质纳米颗粒。所述的无荷载纳米脂质选自以下任意一种：1)由阳离子脂质和甘油酯组成；且阳离子脂质:甘油酯摩尔比为1:10–10:1；2)由阳离子脂质:甘油酯：胆固醇组成，且阳离子脂质:甘油酯摩尔比范围为4‑7:1‑3，阳离子脂质：胆固醇摩尔比范围为1‑2:2‑1。较之现有技术，本发明可显著提高体内mRNA的表达水平和靶向能力，从而产生更有效的免疫治疗效果。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，涉及基于甘油酯的脂质纳米颗粒制剂及其制备方法和应用。

背景技术

疫苗通常有能够被免疫系统识别的抗原构成，且常与能够加强免疫的佐剂搭配使用。通常疫苗分为两大类，即预防性疫苗和治疗性疫苗。预防性疫苗主要用于预防疾病而产生的针对病原体的抗体和免疫细胞。与之相对应的治疗性疫苗，则用于发病后的治疗，其能够在短时间内产生杀伤病原体的免疫细胞，如CD4+和CD8+T淋巴细胞，以及由B淋巴细胞所产生的中和抗体。治疗性疫苗在治疗包括肿瘤和传染性疾病等危及生命的疾病中发挥着重要的作用，故而具有重大的应用价值。

前期所开展的疫苗研发，常采用蛋白质多肽和DNA质粒作为抗原使用(Kantoff，Higano et al.2010,Melero,Gaudernack et al.2014)。蛋白质和多肽类等抗原相对容易制备，且可实现大规模的生产，但是抗原肽的选择主要取决于患者特有的主要组织相容性复合物(Major Histocompatibility Complex,MHC)的类型，因此需要针对个体患者定制特殊的蛋白质或多肽来与之匹配。此外，DNA疫苗由于存在与宿主基因组之间高度重组的风险，且会导致较为严重的免疫排斥反应而限制了其应用空间(McNamara,Nair etal.2015)。

与之相应的，mRNA分子由于其特有的功能特征而作为治疗性疫苗的理想抗原，近年来受到越来越广泛的关注(Sullenger and Nair 2016)。而且，mRNA分子在遗传病、肿瘤免疫治疗和干细胞生物研究领域同样具有广泛的用途(Warren,Manos et al.2010)。相交于DNA而言，mRNA具有多个优点：

1)mRNA不包含严重干扰细胞生理的病毒类启动子(如CMV,SV40)或类似的启动子序列，mRNA不包含会导致毒副作用的细菌来源序列；

2)mRNA不参与宿主基因组的整合，从而消除了有害突变所致的不良影响，如致癌(Wurtele,Little et al.2003)

3)mRNA在细胞内可直接翻译为蛋白质，无需入细胞核行转录过程，因此会更快更安全的发挥作用；

4)mRNA由于不涉及入细胞核，因此有助于提高在非分裂细胞中的转染效率(Kallen and Thess 2014)