[发明专利]基于甘油酯的脂质纳米颗粒制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种无荷载纳米脂质，其特征在于，所述的无荷载纳米脂质选自以下任意一种：

1）由阳离子脂质和甘油酯组成；且阳离子脂质: 甘油酯摩尔比为1:10 – 10:1；

2）由阳离子脂质: 甘油酯：胆固醇组成，且阳离子脂质：甘油酯摩尔比为4-7:1-3，阳离子脂质：胆固醇摩尔比为1-2:2-1；

其中，所述的甘油酯中甘油主链上至少需确保一个羟基的存在。

2.根据权利要求1所述的无荷载纳米脂质，其特征在于所述的阳离子脂质选自DOTAP，DMTAP, DSTAP，DOSPA, DODAB，DOTMA中至少一种，优选DOTAP。

3.根据权利要求1所述的无荷载纳米脂质，其特征在于所述的甘油酯选自单脂肪酸甘油酯或1，2-二脂肪酸甘油酯或1，3-二脂肪酸甘油酯；优选碳链长度为C14-C18的单脂肪酸甘油酯或二脂肪酸甘油酯。

4.根据权利要求3所述的无荷载纳米脂质，其特征在于所述的甘油酯选自单油酸甘油酯、二油酸甘油酯、单亚油酸甘油酯、二亚油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、棕榈酸甘油酯和肉豆蔻酸甘油酯中的任意一种。

5.权利要求1-4中任一项所述的无荷载纳米脂质在制备包封多核苷酸的脂质纳米颗粒制剂中的应用。

6.一种脂质纳米颗粒制剂，其特征在于，包含由权利要求1-4中任一项所述的无荷载纳米脂质包封至少一种核酸分子形成的脂质纳米颗粒。

7.根据权利要求6所述的脂质纳米颗粒制剂，其特征在于，所述的核酸分子选自DNA、RNA、质粒中的任意一种；优选RNA，进一步优选mRNA。

8.根据权利要求6所述的脂质纳米颗粒制剂，其特征在于，所述脂质纳米颗粒中无荷载纳米脂质所带正电荷与mRNA所带负电荷的电荷比为3:1-1:3，优选（0.8-1）:1。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的脂质纳米颗粒制剂，其特征在于，所述的脂质纳米颗粒制剂还包含Opti-MEM或终浓度为140-160mM的NaCl溶液作为缓冲液。

10.权利要求9所述的脂质纳米颗粒制剂的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

1）制备权利要求1-4中任一项所述的无荷载纳米脂质；

2）将所述的无荷载纳米脂质与Opti-MEM或140-160mM NaCl溶液混合，室温静置，促使无荷载纳米脂质在室温下进入稳定状态；将核酸加入到对应的溶液中混匀；然后将含有核酸的溶液与含有无荷载纳米脂质的溶液混匀，室温静置，确保mRNA被纳米脂质所包装，形成所述的脂质纳米颗粒制剂。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述的无荷载纳米脂质的制备方法，包含以下步骤：

1）分别配制浓度为10mg/ml的DOTAP、甘油酯和胆固醇溶液，溶剂选自氯仿、甲醇或乙醇中的任意一种；

2）按照摩尔比混合DOTAP溶液和甘油酯溶液得双组份的混合液，或者按照摩尔比混合DOTAP溶液、甘油酯溶液和胆固醇溶液得三组份的混合液；37-58℃真空旋蒸1-4h，获得薄膜样材料；

3）向薄膜样材料中加入指定体积的DEPC水使其最终浓度为1mg/ml，水浴超声溶解1-2h，获得悬浮物，4℃过夜放置提高混合组分的溶解性和稳定性，次日进一步水浴超声1-2h；

4）按照0.45um、0.22um和0.1um孔径抽滤的顺序，逐次抽滤混合组分，得所述的无荷载纳米脂质。

12.权利要求6-8中任一项所述的脂质纳米颗粒制剂在制备预防性或治疗性疫苗中的应用。

13.权利要求9所述的脂质纳米颗粒制剂在制备预防性或治疗性疫苗中的应用。

14.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求6-8中任一项所述的脂质纳米颗粒制剂。