[发明专利]可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测方法及试剂盒有效
申请号: | 202111065592.1 | 申请日: | 2021-09-13 |
公开(公告)号: | CN113528709B | 公开(公告)日: | 2021-12-10 |
发明(设计)人: | 景寅;张梦;赵立明 | 申请(专利权)人: | 北京华瑞康源生物科技发展有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) 11210 | 代理人: | 刘艳艳 |
地址: | 102200 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 覆盖 13 种型别腺 病毒 荧光 定量 pcr 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,包括特异性引物、特异性探针、内参引物、内参探针、PCR扩增试剂、试剂盒阴性对照品、试剂盒阳性对照品和无核酶水,所述特异性引物及特异性探针的结合位点在感染人呼吸道的13种型别腺病毒的全基因组的高保守区段,所述13种型别腺病毒的型别为1型、2型、3型、4型、5型、6型、7型、11型、14型、16型、21型、35型、55型;
所述特异性引物的序列如SEQ ID NO:1- SEQ ID NO:6所示;
所述特异性探针的序列如SEQ ID NO:7- SEQ ID NO:8所示;
所述PCR扩增试剂包含热启动的DNA聚合酶、dNTPs、UNG酶、dUTP及PCR扩增缓冲液。
2.根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述特异性引物及特异性探针的结合位点是在人腺病毒五联体蛋白所对应的基因序列内部。
3. 根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述内参引物的序列如SEQ ID NO:9- SEQ ID NO:10所示,所述内参探针的序列如SEQ ID NO:11所示,所述内参引物及内参探针检测和结合的区域是人核糖核酸酶P基因区段。
4.根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒阴性对照品为生理盐水。
5.根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒阳性对照品为克隆呼吸道腺病毒五联体蛋白基因序列的工程菌悬液。
6. 根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述特异性引物的上游引物序列如SEQ ID NO:1所示,所述特异性引物的下游引物序列如SEQ ID NO:4所示,所述特异性探针的序列如SEQ ID NO:8所示。
7.根据权利要求1所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述探针为Taqman探针,所述探针上标有荧光基团。
8.根据权利要求7所述的可覆盖13种型别腺病毒的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述荧光基团为FAM、VIC、Cy5、TET、HEX、JOE中的一种或几种。
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