[发明专利]一种多烯磷脂酰胆碱的制备方法

说明书

本发明提供一种多烯磷脂酰胆碱的制备方法，以大豆磷脂为原料，经过硝酸银色谱硅胶柱层析分离制备得到多烯磷脂酰胆碱。本发明制得的多烯磷脂酰胆碱产品其主要活性成分1,2‑二亚油酰磷脂酰胆碱(DLPC)含量达60％以上，大大提高了多烯磷脂酰胆碱产品的质量。

技术领域

本发明涉及一种多烯磷脂酰胆碱的制备方法，属于制药工程技术领域。

背景技术

多烯磷脂酰胆碱(Polyene Phosphatidylcholine，PPC)是从大豆磷脂中提取出来的一种磷脂酰胆碱，是卵磷脂的甘油三酯骨架上含有亚油酸、亚麻酸和油酸的磷脂酰胆碱，其主要活性成分为1,2-二亚油酰磷脂酰胆碱(1,2-Dilinoleoyl-sn-Glycero-3-Phosphatidylcholine，DLPC)，又称为1,2-二亚油酰基卵磷脂。多烯磷脂酰胆碱在化学结构上与重要的内源性磷脂一致，并具有以下生理功能：使受损的肝功能和酶活力恢复正常、调节肝脏的能量平衡、促进肝组织再生、将中性脂肪和胆固醇转化成容易代谢的形式和稳定胆汁。DLPC具有非常重要的生物学功能，它不仅是人体细胞膜的基本构成组分，还是胆碱和亚油酸的一个重要来源，对于维持生物膜的生理活性和基体的正常代谢起至关重要的作用；其胆碱成分参与脂肪的代谢，可预防因脂肪从肝脏排泄缓慢所引起的脂肪肝病变，它还参与人体内必需氨基酸蛋氨酸和其它一些氨基酸的生物合成，并促进脂溶性维生素在体内更好地吸收等；其亚油酸成分属于n-6脂肪酸，是营养学上必需的重要脂肪酸之一，具有降低血清胆固醇含量、预治高血压、心血管疾病及动脉粥样硬化症、抗癌、强化免疫、抑制脂肪沉积等功能。

由于天然磷脂酰胆碱成分复杂、结构相似，因此纯化富集出多烯磷脂酰胆碱的制备技术较为复杂，目前纯化磷脂酰胆碱的方法主要包括溶剂法、氧化铝吸附法、无机盐复合沉淀法、超临界二氧化碳萃取技术、柱色谱技术、膜分离法等。

CN1506368A公开了一种由大豆磷脂提取磷脂酰胆碱的方法，采用饱和烷烃-乙腈-低碳醇双液相混合溶剂系对大豆磷脂进行多级逆流萃取，并将最终萃取液真空脱溶的工艺方法，得磷脂酰胆碱产品。

CN102633832A提供了一种制备磷脂酰胆碱的方法，其包括：醇处理步骤：以粗磷脂为原料，低碳醇和水为混合溶剂，经萃取分离，分离出的醇可溶性产物；硅胶柱层析步骤：对前一步所得产物进行硅胶柱层析，用乙醇梯度洗脱，收集产物溶液干燥步骤：对所得产物溶液进行真空浓缩，冷冻干燥，得到磷脂酰胆碱。

CN103288870A公开了一种注射级高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，包括：(1)将磷脂原料溶于非极性溶剂中，配成一次萃取原料液，离心过滤去除固体杂质，一次分馏萃取得一次萃取液；(2)将所述一次萃取液进行真空浓缩得到磷脂酰胆碱一次产品；(3)将所述磷脂酰胆碱一次萃取产品配成二次萃取原料液，进行二次分馏萃取，得到二次萃取液；(4)将所述二次萃取液经真空浓缩得到磷脂酰胆碱二次萃取产品；(5)将所述磷脂酰胆碱二次萃取产品溶于极性溶剂中，连续通过脱色吸附柱，收集流出液，经真空浓缩、冷冻干燥得到注射级磷脂酰胆碱产品。

CN103613612A提供了一种高纯度磷脂酰胆碱的制备方法，含以下步骤：以低级醇醇溶性粗磷脂为原料，配成醇溶性粗磷脂乙醇溶液，将醇溶性粗磷脂乙醇溶液上样到葡聚糖凝胶SephadexLH-20层析柱中，采用高浓度乙醇洗脱后，收集洗脱液，蒸发掉溶剂，得到高纯度磷脂酰胆碱。

CN108101938A公开了一种多烯磷脂酰胆碱的制备方法，包括以下步骤：(1)以纯度为35-60％的大豆磷脂粉末为原料，采用中性氧化铝吸附，制备得到纯度90％以上的多烯磷脂酰胆碱；(2)以步骤(1)得到的纯度为90％以上的多烯磷脂酰胆碱为原料，采用硅胶吸附，制备得到纯度为95％以上的多烯磷脂酰胆碱。

CN104592292A公开了一种注射用多烯磷脂酰胆碱的制备方法，其步骤包括以大豆磷脂为原料，用合适的溶剂溶解，通过柱色谱以多卤代烷烃-低碳醇-水所组成的三元混合溶剂进行两次洗脱，干燥，得到多烯磷脂酰胆碱产品。