[发明专利]一种去除静注人免疫球蛋白中抗A、抗A血凝素的亲和层析用缓冲液及其用途

权利要求书

1.一种去除静注人免疫球蛋白中的抗A血凝素和抗B血凝素的的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

（1）、取血浆，分离出组分I+II+III，对组分I+II+III进行预纯化，然后用两步离子交换层析法提纯，得亲和层析待上柱样品；

（2）、采用预平衡缓冲液洗亲和层析柱；所述预平衡缓冲液的用量为3倍柱体积以上，预平衡缓冲液的流速为50～300cm/h；采用平衡缓冲液冲洗亲和层析柱，将步骤（1）得到的亲和层析待上柱样品上亲和层析柱，收集流穿液；

（3）、将步骤（2）得到的流穿液经低pH孵放、纳米过滤、超滤，即得；

步骤（2）中，所述预平衡缓冲液由300~500mM的醋酸盐水溶液组成，所述醋酸盐水溶液的pH值为4.0~8.0，所述醋酸盐为醋酸钠；所述平衡缓冲液由醋酸盐水溶液组成，醋酸盐水溶液中醋酸盐的浓度为100mM，所述醋酸盐水溶液的pH值为5.5；所述亲和层析柱的填料为Eshmuno® P anti-A和Eshmuno® P anti-B凝胶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述组分I+II+III是通过低温乙醇法分离获得的；所述预纯化的方法为：向组分I+II+III中加水溶解，加入辛酸钠进行沉淀，过滤，保留液体；所述两步离子交换层析法提纯的操作为：将预纯化所得液体经第一步阴离子交换层析，收集第一步流穿液，再将第一步流穿液经第二步阴离子交换层析，收集第二步流穿液，即得亲和层析待上柱样品；所述第一步阴离子交换层析的填料为Q基团凝胶，所述第二步阴离子交换层析的填料为Q基团凝胶；

步骤（2）中，所述平衡缓冲液的用量为5倍柱体积以上，平衡缓冲液的流速为50～300cm/h；所述待上柱样品的流速为20~300cm/h。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述Eshmuno® P anti-A和 Eshmuno® Panti-B凝胶的质量比为1：1；所述预平衡缓冲液的用量为3倍柱体积，预平衡缓冲液的流速为200cm/h；所述平衡缓冲液的流速为200cm/h，待上柱样品的流速为200cm/h。