[发明专利]一种基于腺嘌呤的花菁探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于腺嘌呤的花菁探针，其特征在于：所述探针的结构如下式所示：

2.一种如权利要求1所述的基于腺嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：所述制备方法步骤如下：

（1）将2-萘肼盐酸盐与3-甲基-2-丁酮在乙酸和氮气保护条件下回流2~2.5小时分离提纯得到产物1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚；

（2）将步骤（1）中得到的1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚与6-溴己酸在乙腈和氮气保护条件下回流24~36小时分离提纯得到产物3-（5-羧基戊基）-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓；

（3）将步骤（2）中得到的3-（5-羧基戊基）-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓与N-[（1E，3E）-3-（苯基亚氨基）丙-1-烯-1-基]苯胺在醋酸与醋酸酐存在，并且氮气保护条件下回流3~4小时，分离提纯得到产物3-（5-羧基戊基）-1,1-二甲基-2-（（1E，3E）-4-（N-苯基乙酰胺）丁烷-1,3-二烯-1-基）-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓，其中，醋酸与醋酸酐的体积比为1:1；

（4）将步骤（3）中得到的3-（5-羧基戊基）-1,1-二甲基-2-（（1E，3E）-4-（N-苯基乙酰胺）丁烷-1,3-二烯-1-基）-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓与3-（5-羧基戊基）-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓在醋酸与吡啶存在，并且氮气保护条件下回流1~2小时，经过分离提纯得到蓝绿色固体CY5.5染料，其中醋酸与吡啶的体积比为1:1；

（5）将步骤（4）中得到的蓝绿色固体CY5.5染料与腺嘌呤先在4-二甲氨基吡啶（DMAP）的二氯甲烷溶液中搅拌0.5~1小时，然后加入N,N'-二环己基碳二亚胺（DCC）反应，最后通过薄层色谱法提纯得到基于腺嘌呤的花菁探针。

3.如权利要求2所述的基于腺嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤（1）~（4）中所述回流反应温度为110~120℃，步骤（1）中提纯所用展开剂为体积比为4:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂；步骤（2）中用体积比为1:1的二氯甲烷和乙醚的混合溶剂析出固体产物；步骤（4）提纯所用展开剂为体积比为10:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂。

4.如权利要求2所述的基于腺嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤（5）中所述反应为常温反应，反应时间为30~48小时。

5.如权利要求2所述的基于腺嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤（5）中所述蓝绿色固体CY5.5染料与腺嘌呤的摩尔当量比为：1:2，N,N'-二环己基碳二亚胺与4-二甲氨基吡啶的摩尔当量比为1.5:2；薄层色谱法提纯所用展开剂为体积比为30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物。

6.如权利要求1所述的基于腺嘌呤的花菁探针在制备检测血红蛋白的试剂中的应用，其特征在于：所述基于腺嘌呤的花菁探针在十二烷基苯磺酸钠作为溶液的条件下检测血红蛋白。