[发明专利]枯草芽孢杆菌、红发夫酵母和根霉混合烟草发酵方法在审
| 申请号： | 202111038749.1 | 申请日： | 2021-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN113846125A | 公开（公告）日： | 2021-12-28 |
| 发明（设计）人： | 胡彬彬;邹聪明;朱明军;麦景;宁英;晋艳;蔺忠龙;何悦;陈颐;姜永雷;刘志华;刘春波;王保兴;尚善斋 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草农业科学研究院 |
| 主分类号： | C12P1/02 | 分类号： | C12P1/02;C12P1/04;A24B15/20;C12R1/125;C12R1/645;C12R1/845 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 吴金姿 |
| 地址： | 650021 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 枯草 芽孢 杆菌 红发夫 酵母 混合 烟草 发酵 方法 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌、红发夫酵母和根霉混合烟草发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：将枯草芽孢杆菌接种于LB琼脂培养基上，在37℃培养24h；将红发夫酵母接种于YPD琼脂培养基上，在22℃培养5-7天，得到枯草芽孢杆菌、红发夫酵母的单菌落；
S2：将步骤S1中枯草芽孢杆菌、红发夫酵母的单菌落分别接种到LB液体培养基、YPD液体培养基中，并分别于37℃培养20h、22℃培养28-29h，分别得到枯草芽孢杆菌种子液与红发夫酵母种子液；
S3：将枯草芽孢杆菌种子液与红发夫酵母种子液等体积混合得到混合菌液；
S4：将步骤S3的混合菌液离心并收集菌体；
S5：对步骤S4收集的菌体进行洗涤；
S6：对步骤S5洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；
S7：往烟叶中加入步骤S6的菌悬液和根霉粉，在25℃下发酵7-10天。
2.根据权利要求1所述的烟草发酵方法，其特征在于：
步骤S1中所述的LB琼脂培养基成分为胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化钠10g/L、琼脂20g/L；YPD琼脂培养基成分为葡萄糖20g/L、胰蛋白胨20g/L、酵母粉10g/L、琼脂20g/L。
3.根据权利要求1所述的烟草发酵方法，其特征在于：
步骤S2中所述的LB液体培养基成分为胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化钠10g/L；所述YPD液体培养基成分为葡萄糖20g/L、胰蛋白胨20g/L、酵母粉10g/L。
4.根据权利要求1或2或3所述的烟草发酵方法，其特征在于：
步骤S7中所述的烟叶在发酵前粉碎成粉末，过200目筛。
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