[发明专利]一种子宫内膜类器官培养基及培养方法有效
申请号: | 202111036036.1 | 申请日: | 2021-09-06 |
公开(公告)号: | CN113957036B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 兰坚强;朱宇;张慧星;刘丹;黄敏 | 申请(专利权)人: | 创芯国际生物科技(广州)有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人: | 刘新年 |
地址: | 510600 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 子宫 内膜 器官 培养基 培养 方法 | ||
1.一种子宫内膜类器官液体培养基,其特征在于:按照终浓度组成为:20-80 ng/ml的EGF,100-400 ng/ml的Noggin,80-500 ng/ml的R-spondin 1,100-400 ng/ml的Wnt3a,25-50 ng/ml的FGF9,30-100 ng/ml的KIAA1199,20-80 ng/ml的sox2,15-80 nM异黄酮,200-1000 nM的CHIR99021,8-20μM的A83-01,8-18μM的RKI-1477,50-100 ug/ml的原代细胞抗生素;以上成分均溶于DMEM/F12培养液中;所述子宫内膜类器官为子宫内膜标本或子宫内膜癌标本培养形成的类器官。
2.一种子宫内膜类器官培养方法,其特征在于:是采用权利要求1所述的液体培养基,包括以下步骤:
步骤一,将获得的子宫内膜标本或子宫内膜癌标本经过预处理得到细胞数量为3-50个细胞的细胞团;
步骤二,将细胞团与Matrigel基质胶混匀后铺板,待凝固后倒置固定20-30 min;
步骤三,加入所述液体培养基,于37℃、5% CO2条件下培养4-7天,期间每隔2-3天更换一次培养基,即得。
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