[发明专利]一种高纯度橄榄苦苷的分离制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯度橄榄苦苷的分离制备方法，将油橄榄叶经水加热回流提取得到橄榄苦苷粗提物；将橄榄苦苷粗提物利用大孔吸附树脂进行分离富集得到橄榄苦苷洗脱物；将橄榄苦苷洗脱物利用高速逆流色谱分离技术进行分离纯化得到橄榄苦苷粗制品；将橄榄苦苷粗制品利用制备型液相色谱进行分离纯化得到橄榄苦苷精制品；橄榄苦苷精制品冷冻干燥后获得高纯度橄榄苦苷。本发明分离提取的橄榄苦苷纯度高，纯度＞98.5％，能够作为橄榄苦苷的标准样品。

技术领域

本发明涉及一种高纯度橄榄苦苷的分离制备方法，属于药效成分提取技术领域。

背景技术

油橄榄(Olea europaea L.)为木犀科木犀榄属(Olea)常绿乔木，主要分布在地中海沿岸国家。油橄榄叶在欧美国家有较长的种植和食用历史，干燥叶茶、粉末或提取物常口服用于降血压、降血糖、抗炎和抗氧化。油橄榄的主要药效成分为橄榄苦苷(oleuropein)，橄榄苦苷在油橄榄叶中含量最高，可达4％-12％。

橄榄苦苷(Oleuropein)，CAS：32619-42-4、分子式：C₂₅H₃₂O₁₃、分子量： 540.51、化学命名：2H-Pyran-4-acetic acid,3-ethylidene-2-(β-D-glucopyranosyloxy) -3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-,2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethyl ester,(2S,3E,4S)、性状：白色粉末、熔点：96-98℃、比旋光度：[α]²⁰＝-190.764°(C＝0.025,MeOH)、溶解性：易溶于水、甲醇、乙醇，可溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于石油醚、乙醚、氯仿等。化学结构式为：

药理学研究表明，橄榄苦苷具有降血压、降血脂、降血糖、抗炎、抗氧化、抗肿瘤和治疗老年痴呆等作用。目前，在欧美国家已有多种以油橄榄叶提取物为原料的产品上市。然而，目前国内市场缺乏规范统一的橄榄苦苷标准样品，相关产品质量良莠不齐，橄榄苦苷的纯度比较差。因此，亟待一种能够分离出高纯度橄榄苦苷的方法，提供高纯度的橄榄苦苷从而作为橄榄苦苷的标准样品，进而规范油橄榄叶提取物及相关产品的品质，保证以此为原料的功能食品、保健食品和化妆品的质量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，而提供一种高纯度橄榄苦苷的分离制备方法，本发明分离提取的橄榄苦苷纯度高，纯度＞98.5％，能够作为橄榄苦苷的标准样品。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种高纯度橄榄苦苷的分离制备方法，包括以下步骤：

(1)将油橄榄叶经水加热回流提取得到橄榄苦苷粗提物；

(2)将橄榄苦苷粗提物利用大孔吸附树脂进行分离富集得到橄榄苦苷洗脱物；

(3)将橄榄苦苷洗脱物利用高速逆流色谱分离技术进行分离纯化得到橄榄苦苷粗制品；

(4)将橄榄苦苷粗制品利用制备型液相色谱进行分离纯化得到橄榄苦苷精制品；橄榄苦苷精制品冷冻干燥后获得高纯度橄榄苦苷。

上述技术方案中，步骤(1)中，所述的油橄榄叶，为油橄榄(Olea europaea L.)的干燥叶，粉碎后过10目得到橄榄叶粗粉，橄榄叶粗粉加水进行回流提取。

上述技术方案中，步骤(1)中，所述的橄榄叶粗粉与水的重量比为1：4-7。

上述技术方案中，步骤(1)中，所述的加热回流提取，指的是加热至50-60℃回流提取4-9h得到橄榄苦苷粗提物(得率为34-40％，提取率为80-90％)，橄榄苦苷粗提物中橄榄苦苷的含量为10-15％。