[发明专利]一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒，试剂盒的成分包括萃取液、结合液、磁珠洗脱液、校准品溶液和磁珠；萃取液为磁性弱阳离子交换萃取液；结合液包含80‑85wt％的异丙醇、7‑10wt％的PEG8000和3wt％的Brij58；磁珠洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B；校准品溶液包括系列浓度已知的肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、变肾上腺素、去甲变肾上腺素、3‑甲氧酪胺的混合溶液；磁珠由磁性载体核心和包覆在其外侧进行修饰的壳层构成。本发明试剂盒使用磁珠法代替液液萃取方法中反复震荡的方式，降低了前处理的难度，缩短了前处理时间，利于快速测定人血浆中6种儿茶酚胺的含量。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒。

背景技术

儿茶酚胺类物质主要包括肾上腺素(Epinephrine，E)、去甲肾上腺素(Norepinephrine，NE)及多巴胺(Dopamine，DA)。儿茶酚胺类物质是由肾上腺髓质、肾上腺神经元以及肾上腺外嗜铬体合成与分泌的单胺类神经递质，具有较强的生理学活性的内源性物质，在大脑和神经信号传导中起着重要的作用。血浆中儿茶酚胺类物质浓度水平与人体多种生理、病理现象有密切关系，检测生物样本中的儿茶酚胺类物质浓度不仅对于嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、神经母细胞瘤、高血压、心肌梗塞、肾上腺髓质增生等疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义，并且有助于甲状腺功能异常、充血性心力衰竭、糖尿病、肾功能不全等疾病的诊断。近年来，国内外对儿茶酚胺类物质的分析检测主要为高效液相色谱法、荧光光度法、毛细管电泳法、化学发光分析法、电化学分析法及液质联用法。大多数方法的灵敏度可以满足尿液儿茶酚胺的检测，但是对于血浆样品，目前医院常规采用的是电化学分析法，但是电化学分析法样本处理复杂，分析时间长，对于快速获得诊断结果具有一定的局限性。

国内没有针对于人血中儿茶酚胺共同检测的试剂盒，检测耗时时间长，操作繁琐，对人员技术要求高，无法配合自动化使用。

发明内容

本发明的目的在于克服传统技术中存在的上述问题，提供一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明是通过以下技术方案实现：

本发明提供一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒，试剂盒的成分包括萃取液、结合液、磁珠洗脱液、校准品溶液和磁珠；

所述萃取液为磁性弱阳离子交换萃取液；

所述结合液包含80-85wt％的异丙醇、7-10wt％的PEG8000和3wt％的Brij58；

所述磁珠洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B，所述洗脱液A为去离子水，所述洗脱液B由50wt％的0.05-0.1％甲酸水溶液和50wt％的乙腈组成；

所述校准品溶液包括系列浓度已知的肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、变肾上腺素、去甲变肾上腺素、3-甲氧酪胺的混合溶液；

所述磁珠由磁性载体核心和包覆在其外侧进行修饰的壳层构成。

进一步地，上述磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒中，所述磁性载体核心为四氧化三铁磁性纳米微球。

进一步地，上述磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒中，所述壳层由带羧基的聚苯乙烯二乙烯基苯制成。

进一步地，上述磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒中，所述结合液包含82wt％的异丙醇、9wt％的PEG8000和3wt％的Brij58。