[发明专利]一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒在审
申请号: | 202111027325.5 | 申请日: | 2021-09-02 |
公开(公告)号: | CN113720939A | 公开(公告)日: | 2021-11-30 |
发明(设计)人: | 刘振东;郭雅聪 | 申请(专利权)人: | 北京梅斯质谱生物科技有限责任公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 北京快易权知识产权代理有限公司 11660 | 代理人: | 衣秀丽 |
地址: | 102699 北京市大兴区中关村科技园区大兴生*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磁珠法 自动化 定量 测定 血浆 儿茶酚胺 试剂盒 | ||
1.一种磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒,其特征在于,试剂盒的成分包括萃取液、结合液、磁珠洗脱液、校准品溶液和磁珠;
所述萃取液为磁性弱阳离子交换萃取液;
所述结合液包含80-85wt%的异丙醇、7-10wt%的PEG8000和3wt%的Brij58;
所述磁珠洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B,所述洗脱液A为去离子水,所述洗脱液B由50wt%的0.05-0.1%甲酸水溶液和50wt%的乙腈组成;
所述校准品溶液包括系列浓度已知的肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、变肾上腺素、去甲变肾上腺素、3-甲氧酪胺的混合溶液;
所述磁珠由磁性载体核心和包覆在其外侧进行修饰的壳层构成。
2.根据权利要求1所述的磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒,其特征在于:所述磁性载体核心为四氧化三铁磁性纳米微球。
3.根据权利要求1所述的磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒,其特征在于:所述壳层由带羧基的聚苯乙烯二乙烯基苯制成。
4.根据权利要求1所述的磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒,其特征在于:所述结合液包含82wt%的异丙醇、9wt%的PEG8000和3wt%的Brij58。
5.根据权利要求1所述的磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒,其特征在于:所述校准品溶液包括系列浓度已知的100μg/mL的肾上腺素、400μg/mL的去甲肾上腺素、2mg/mL的多巴胺、200μg/mL的变肾上腺素、200μg/mL的去甲变肾上腺素、400μg/mL的3-甲氧酪胺的混合溶液。
6.权利要求1-5任一项所述磁珠法自动化定量测定血浆中6种儿茶酚胺的试剂盒的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)在离心管中加入血浆和萃取液并匀浆,于58℃水浴孵育20-40min后离心;离心后的上清液转移至新的离心管中,加入磁珠和结合液,结合时间7-10min;使用磁铁将磁珠吸附至管壁,弃去离心管内所有液体;
2)在离心管中加入洗脱液A,混匀后,使用磁铁将磁珠吸附至管壁,弃去管内所有液体;在离心管中加入洗脱液B,混匀后,于56℃水浴下洗脱4-6min,使用磁铁将磁珠吸附至管壁,将磁珠洗脱液转移至新的离心管内,在-22~-18℃下保存备用。
7.根据权利要求6所述的试剂盒的应用,其特征在于:所述离心管容量为1.5-2mL。
8.根据权利要求6所述的试剂盒的应用,其特征在于:加入的试剂为:血浆50mg,萃取液300μL,磁珠20μL,结合液300μL,洗脱液A和洗脱液B各400μL。
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