[发明专利]一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用

说明书

本发明公开了一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用，该培养基包括：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫酸镁0.5～0.7g、吐温80 1～2mL、L‑半胱氨酸盐酸盐1～2g、维生素B₂ 1～3mg，最后加入乙酸调节至4～6g/100mL。本发明的培养基配方和培养方法具有专一性强、培养效率高、培养效果稳定、成分简单、成本低廉、易于商业化，可以快速高效培养乳酸菌HSLZ‑75^T和HSCY 2073。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用。

背景技术

研究发现自然界中尚存在90％以上未有合适培养方法的微生物，使用传统的细菌培养方法仅能培养其中的一小部分细菌。应用传统方法培养出的微生物都是已知微生物，对新的微生物物种的培养基成分、分离、培养方法的研究和报道较少。微生物培养困难是与抵制培养的特殊原因，包括温度、pH、氧气、营养等众多因素有关，微生物新种的培养具有众多的技术挑战。

乳酸菌泛指一大类能够发酵糖类产生大量乳酸的细菌，在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性，目前约有200余种。乳酸菌具有调节胃肠道菌群、改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价、降低血清胆固醇、控制内毒素、抑制肠道内腐败菌生长、提高机体免疫力等多种生理功能。

传统酿造食醋采用开放式发酵、原辅料不经过灭菌处理，酿造过程中微生物种类及其丰富，许正宏等学者对镇江香醋醋醅中微生物群落结构进行解析发现该过程中有上百种微生物参与发酵。乳酸菌普遍存在于食醋发酵过程中，尤其是传统固态酿造食醋，乳酸菌占比可达到60％以上，对产品品质具有重要影响。深入研究不同类型乳酸菌培养基、分离和培养方法及其应用对食醋酿造行业具有重要意义。因此，创新培养基配方和培养方法，更好的培养乳酸菌具有重要意义。

目前，许多不同的乳酸菌对培养基和培养方法具有独特的需求，即使同一种乳酸菌的不同菌株之间，在培养基和培养方法上也具有较大的差异。如专利CN202010877453.8公开了一种乳酸菌分离培养基配方及培养方法，虽然其所培养目的乳酸菌与新种乳酸菌HSLZ-75^T的16S rRNA序列具有100％的一致性，但其目的乳酸菌在论文(Lactobacillusjinshani sp.nov.,isolated from solid-state vinegar culture of Zhenjiangaromatic vinegar.Antonie van Leeuwenhoek)公开的乳酸菌HSLZ-75^T的培养基配方上无法生长。且专利CN 202010877453.8中目的乳酸菌在其固体平板上需培养7-14天，培养时间较长；培养基配方极其复杂、操作不便、成本高，液体培养中需要添加30余种物质，其中仅维生素就有9种；含有酒醅浸出液且用量大，易导致培养基的稳定性差，酒醅浸出液一般人员难以获得，整体应用性不强。专利CN 202011227512.3公开了一种乳酸菌Z-1的培养基配方和分离方法，但其培养时间较长，固体平板上需要7天后形成肉眼可见菌落；培养基成分复杂，液体培养中需要添加近20种物质；操作复杂，需要单独配制含有大量复合维生素B的溶液，使用前需过膜除菌，且需要乳酸和乙酸2种酸调节pH值；需要自制麸皮浸出液，培养基稳定性差。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种新型特异性的乳酸菌培养基，本发明的培养基主要针对新型乳酸菌，是一种专一、高效、稳定、方便的新型乳酸菌培养基配方，可以快速高效培养乳酸菌。

本发明还提供了一种新型乳酸菌的培养基的培养方法和应用。