[发明专利]呕吐毒素特异性核酸适配体及应用

权利要求书

1.呕吐毒素核酸适配体试纸条，其特征在于，包括样品吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板，所述样品吸收垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘贴在底板上；

所述样品吸收垫包被有检测探针，所述检测探针为荧光素标记的呕吐毒素适配体，适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述检测线包被有序列CS1，其序列如SEQID NO:3所示；

所述质控线包被有序列CS2，其序列如SEQ ID NO:4所示；

所述序列CS1的5’末端标记生物素，且通过链霉亲和素与其上的生物素偶联形成共价键包被在硝酸纤维素膜上；

所述荧光素为Cy5或量子点。

2.根据权利要求1所述的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述检测探针的制备方法如下：将荧光素标记的呕吐毒素适配体用结合缓冲液溶解至0.05 μM；所述结合缓冲液的成分为：10 mM Tris，120 mM NaCl，5 mM KCl，200 mM MgCl₂，50 mM CaCl₂，5% v/v甲醇，1% PEG20000，2%蔗糖，0.1% v/v Tween-20，pH为7.4。

3.根据权利要求1所述的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述质控线的制备方法如下：将生物素标记的序列CS2用水配制成浓度为6 μM，取350 μL与50 μL的1 mg/mL链霉亲和素溶液于室温下孵育2 h，得到生物素-链霉亲和素偶联物；将偶联物固定到硝酸纤维素膜上的质控线处，检测线和质控线之间间隔5 mm。

4.权利要求1-3任一项所述核酸适配体试纸条在饲料及食品中呕吐毒素检测中的应用；所述应用为非诊断和治疗目的。