[发明专利]一种适配体DNA-荧光探针传感器及其制备方法和利用其定量检测GTX1/4的方法

权利要求书

1.一种用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将等体积等浓度的DNA S1溶液、DNA Spc溶液混合后稀释，进行加热反应，冷却后得到双链S1-Spc溶液，所述DNA S1、DNA Spc的基因序列分别为：

DNA S1:3’-CCTTAATGGATTGGAGTTCCTC-5’-6-FAM；

DNA Spc:Dabcyl-3’-GAGGATTTCCAATCC-5’；

(2)将金属框架化合物HKUST-1以甲醇蒸汽熏蒸7h，得到HK-7；

(3)将双链S1-Spc溶液与HK-7的分散液混合后稀释，进行震荡培养；

(4)向步骤(3)得到的溶液中加入DNA S2溶液，震荡培养得到装载有S1-Spc双链与S2单链的HK-7溶液，即为用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器S1-Spc/S2/HK-7；

所述DNA S2的基因序列为：3’-GAGGAACTCCAATCC-5’。

2.根据权利要求1所述的用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：

(1)将等体积等浓度的DNA S1溶液、DNA Spc溶液混合后稀释至DNA S1的浓度为3μM，95℃加热反应5min，冷却后得到双链S1-Spc溶液；

(2)将金属框架化合物HKUST-1以甲醇蒸汽熏蒸7h，得到HK-7；

(3)将20μL双链S1-Spc溶液与10μL 20mg/mL的HK-7的分散液混合后稀释至总体积200μL，37℃震荡培养3h；

(4)向200μL步骤(3)得到的溶液中加入10μL 4μM DNA S2溶液，37℃震荡培养2h，得到装载有S1-Spc双链与S2单链的HK-7溶液，即为用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器S1-Spc/S2/HK-7。

3.根据权利要求1或2所述的用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器的制备方法，其特征在于，所述DNA S1溶液、DNA Spc溶液、DNA S2溶液、HK-7的分散液是通过分别将DNA S1、DNA Spc、DNA S2、HK-7溶解在PH＝8.0的含有40mM Tris、1mM EDTA、12.5mM乙酸镁的TAE/Mg²⁺缓冲溶液中得到。

4.根据权利要求1或2所述的用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)、(3)中，稀释所用的溶液均为PH＝8.0的含有40mM Tris、1mMEDTA、12.5mM乙酸镁的TAE/Mg²⁺缓冲溶液。

5.一种如权利要求1-4任意一项所述的制备方法制备得到的用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器。

6.如权利要求5所述的用于GTX1/4检测的适配体DNA-荧光探针传感器在定量检测GTX1/4浓度中的应用。