[发明专利]一种动物源性食品中万古霉素的检测方法

权利要求书

1.一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：包括以下步骤：

步骤一、将待测动物源性食品样品与含有卤代乙酸的提取液混合均匀，然后超声提取，离心过滤，得到的上清液；

步骤二、将得到的上清液通过已经活化的阳离子固相萃取小柱进行富集；采用甲酸水溶液和甲醇依次淋洗阳离子固相萃取小柱，去除杂质，接着用氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，氮吹干，用定容液定容后，过滤，得到净化液；

步骤三、采用液相色谱-质谱串联系统对制得的净化液进行检测。

2.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的提取液中，卤代乙酸水溶液和乙腈的体积比为4-20：1，卤代乙酸水溶液的质量浓度为0.002-0.06。

3.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的卤代乙酸为一氟乙酸、二氟乙酸、三氟乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、一溴乙酸、二溴乙酸、三溴乙酸、一碘乙酸、二碘乙酸、三碘乙酸中的一种或几种的混合。

4.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的步骤一中，超声提取的条件为超声频率60Hz-120Hz，提取10min-30min。

5.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的步骤二中，阳离子固相萃取小柱的活化方法为：依次用3mL甲醇和3mL水活化阳离子固相萃取小柱。

6.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的步骤二中，淋洗用的甲酸水溶液，甲酸与水的体积比为0.05%-3%：1。

7.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的步骤二中，洗脱用的氨水甲醇溶液，氨水与甲醇的体积比为1%-8%：1。

8.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的定容液为甲醇、水、甲酸按照体积比10:90:0.1混合的溶液。

9.根据权利要求1所述的一种动物源性食品中万古霉素的检测方法，其特征是：所述的步骤三中，采用液相色谱-质谱串联系统对制得的净化液进行检测的具体过程为：采用两种流动相：流动相A为体积比为0.1%的甲酸水溶液，流动相B为甲醇；采用如下分离梯度进行反相分离：10%-65%流动相B，分离3.5 min；65%流动相B，平衡2 min；之后采用100%流动相B，冲洗1 min；质谱采用正离子多反应监测模式采集数据，离子源温度150℃，离子源电压3000V，去溶剂温度450℃，去溶剂气流速800L/h；万古霉素定量离子对725.4/144.2m/z，碰撞能量20V，锥孔电压30V，驻留时间240ms；万古霉素定性离子对725.4/100.1m/z，碰撞能量26V，锥孔电压30V，驻留时间240ms。