[发明专利]一种牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110998864.7 | 申请日: | 2021-08-28 |
公开(公告)号: | CN113583102B | 公开(公告)日: | 2023-09-19 |
发明(设计)人: | 王光花;张敏 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | C07K14/46 | 分类号: | C07K14/46;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/17;A61P31/04;G01N33/569;G01N33/68 |
代理公司: | 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司 11678 | 代理人: | 阮文 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肽聚糖 识别 蛋白 重组 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白在制备诊断细菌感染试剂中的应用,其特征在于:所述牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,细菌为无乳酸链球菌、鳗弧菌、创伤弧菌、藤黄微球菌、枯草杆菌和迟缓爱德华氏菌。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于:所述牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述应用,其特征在于:所述牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白的制备方法,包括以下步骤:
S1.以牙鲆PGRP ORF区基因序列为模板,采用上、下游引物对其进行扩增得到目的DNA;上游引物序列如SEQ ID NO.3所示,下游引物序列如SEQ ID NO.4所示;
S2.将扩增得到的目的DNA与Blunt E1质粒连接,转化感受态细胞,得到重组质粒;
S3.将构建成功的重组质粒转化表达菌株进行诱导培养,再进过纯化、复性后得到牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白。
4.根据权利要求3所述应用,其特征在于:步骤S3中,采用海狸磁珠对粗牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白进行纯化。
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