[发明专利]InDel标记引物组及其在花椰菜‘DX-108’品种或种子纯度鉴定中的应用有效
| 申请号: | 202110998739.6 | 申请日: | 2021-08-27 |
| 公开(公告)号: | CN113604601B | 公开(公告)日: | 2023-10-27 |
| 发明(设计)人: | 孙德岭;姚星伟;杨迎霞;陈锐;牛国保;刘莉莉;单晓政;张小丽;文正华;江汉民 | 申请(专利权)人: | 天津市农业科学院 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人: | 余光军 |
| 地址: | 300384 天津市西青区津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | indel 标记 引物 及其 花椰菜 dx 108 品种 种子 纯度 鉴定 中的 应用 | ||
1.花椰菜品种‘DX-108’的InDel标记引物对组,其特征在于,所述InDel引物对组由以下引物对1-引物对12组成:
引物对1:由SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物组成;
引物对2:由SEQ ID NO.3所示的正向引物和SEQ ID NO.4所示的反向引物组成;
引物对3:由SEQ ID NO.5所示的正向引物和SEQ ID NO.6所示的反向引物组成;
引物对4:由SEQ ID NO.7所示的正向引物和SEQ ID NO.8所示的反向引物组成;
引物对5:由SEQ ID NO.9所示的正向引物和SEQ ID NO.10所示的反向引物组成;
引物对6:由SEQ ID NO.11所示的正向引物和SEQ ID NO.12所示的反向引物组成;
引物对7:由SEQ ID NO.13所示的正向引物和SEQ ID NO.14所示的反向引物组成;
引物对8:由SEQ ID NO.15所示的正向引物和SEQ ID NO.16所示的反向引物组成;
引物对9:由SEQ ID NO.17所示的正向引物和SEQ ID NO.18所示的反向引物组成;
引物对10:由SEQ ID NO.19所示的正向引物和SEQ ID NO.20所示的反向引物组成;
引物对11:由SEQ ID NO.21所示的正向引物和SEQ ID NO.22所示的反向引物组成;
引物对12:由SEQ ID NO.23所示的正向引物和SEQ ID NO.24所示的反向引物组成。
2.用于鉴定花椰菜品种‘DX-108’真实性或者鉴定花椰菜杂交种种子纯度‘DX-108’的PCR检测试剂盒,该PCR检测试剂盒包括:dNTPs、Taq酶、MgCl2、由正向引物和反向引物组成的PCR引物对、扩增缓冲液和灭菌水;其特征在于,所述的PCR引物对是权利要求1中的引物对1-引物对12中的任何一对。
3.权利要求1所述的InDel标记引物对组在花椰菜杂交种‘DX-108’品种真实性鉴定中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,包括:
(1)提取待检测的花椰菜植株样品的基因组DNA;
(2)以所提取的样品基因组DNA为模板,分别以权利要求1的12对引物对为正反向引物建立PCR扩增体系分别进行PCR扩增;
(3)如果12种扩增产物中的每一种扩增产物的带型均同时具有花椰菜杂交种‘DX-108’父母本的带型,则待检测花椰菜品种为花椰菜杂交种‘DX-108’;如果12种扩增产物中的任何一种扩增产物的带型不同时具有花椰菜杂交种‘DX-108’父母本的带型,则待检测花椰菜品种则不是花椰菜杂交种‘DX-108’。
5.根据权利要求4所述的应用,特征在于,步骤(2)中所述的PCR扩增体系为:10×buffer 1.0μL,25mM MgCL2 1.0μL,2mM dNTPs 1.0μL,10μM正向引物与反向引物各1.0μL,0.5单位的Taq DNA聚合酶0.2μL,模板50ng,加ddH2O至10μL;
所述的PCR扩增程序为:95℃3min;95℃15s,58℃15s,72℃20s,循环35次;72℃5min。
6.根据权利要求4所述的应用,特征在于,所述的花椰菜杂交种‘DX-108’的母本为PN-644,所述花椰菜杂交种‘DX-108’的父本为PN-643。
7.权利要求1所述的InDel标记引物对组在鉴定花椰菜杂交种‘DX-108’种子纯度中的应用。
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