[发明专利]上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法

说明书

本申请公开了一种上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法，该上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法通过将上尿路尿路上皮癌组织小块置于含有Ⅱ型胶原酶的抑制剂中进行第一消化处理，得到第一消化物；将第一消化物置于含有抑制剂的胰酶替代物中进行第二消化处理，得到第二消化物；对第二消化物依次进行第一中和处理、过滤处理和离心处理，得到单细胞沉淀；将单细胞沉淀置于预设培养基和基底胶的混合基底中进行重悬处理，得到含有所有细胞的凝胶悬液；将凝胶悬液按照预设方案进行培养，得到上尿路尿路上皮癌类器官。通过本方案可以为化疗药物的使用及上尿路尿路上皮肿瘤的个性化治疗提供可靠的临床数据。

技术领域

本申请涉及类器官培养技术领域，具体涉及一种上尿路尿路上皮癌类器官培养方法。

背景技术

上尿路尿路上皮癌(Upper Urinary Tract Urothelial Cell Carcinoma,UTUC)是一种罕见的泌尿生殖系统肿瘤，起源于上尿路的尿路上皮内层。UTUC占所有尿路上皮癌的5-10％和肾癌的10％。尽管UTUC发病率低，但其特点是死亡率和复发率高，60％的病例在诊断时是侵袭性的，pT2/pT3期侵犯肌壁的患者的5年生存率低于50％，pT4期患者的5年生存率低于10％。

对于晚期上尿路尿路上皮癌患者而言，肾输尿管根治性切除术联合膀胱袖口切除术仍然是UTUC的标准治疗方法，全身性化疗和新辅助/辅助化疗治疗策略均可有效减缓晚期患者的疾病进展、延长生存期。

但由于UTUC是一种较为罕见的泌尿生殖系统肿瘤，临床上化疗药物的使用常常是沿袭下来的经验处方或者是医生个人的治疗经验，不能为化疗药物的使用及上尿路尿路上皮肿瘤的个性化治疗提供可靠的临床数据。

发明内容

本申请实施例提供一种上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法，可以为化疗药物的使用及上尿路尿路上皮肿瘤的个性化治疗提供可靠的临床数据。

本申请实施例提供了上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法，包括：

将上尿路尿路上皮癌组织小块置于含有Ⅱ型胶原酶的抑制剂中进行第一消化处理，得到第一消化物；

将所述第一消化物置于含有抑制剂的胰酶替代物中进行第二消化处理，得到第二消化物；

对所述第二消化物依次进行第一中和处理、过滤处理和离心处理，得到单细胞沉淀；

将所述单细胞沉淀置于预设培养基和基底胶的混合基底中进行重悬处理，得到含有所有细胞的凝胶悬液；

将所述凝胶悬液按照预设方案进行培养，得到上尿路尿路上皮癌类器官。

在本申请实施例提供的上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法中，所述将所述凝胶悬液按照预设方案进行培养，得到上尿路尿路上皮癌类器官，包括：

将所述凝胶悬液接种至六孔板中进行孵育，得到固化凝胶；

将所述固化凝胶置入所述预设培养基中进行培养，得到所述上尿路尿路上皮癌类器官。

在本申请实施例提供的上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法中，所述将所述固化凝胶置入所述预设培养基中进行培养，得到所述上尿路尿路上皮癌类器官，包括：

将所述固化凝胶置入所述预设培养基；

将所述预设培养基置入具有预设环境的培养箱中，以对所述固化凝胶进行培养；

每间隔第一预设时长对所述预设培养基进行更换；

当对所述固化凝胶培养第二预设时长后，得到所述上尿路尿路上皮癌类器官，所述第二预设时长大于所述第一预设时长。

在本申请实施例提供的上尿路尿路上皮癌类器官的培养方法中，所述将所述凝胶悬液接种至六孔板中进行孵育，得到固化凝胶，包括：