[发明专利]一种基于定量PCR鉴定鸭龄的方法在审
| 申请号： | 202110992531.3 | 申请日： | 2021-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN113564265A | 公开（公告）日： | 2021-10-29 |
| 发明（设计）人： | 刘雅丽;任晋东;蒋永健;马敏彪;卢立志;李国勤;沈建良 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 赵艳 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 定量 pcr 鉴定 方法 | ||
1.一种基于定量PCR鉴定老鸭的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)分别提取被鉴定个体以及一组一年鸭龄以上老鸭的新鲜鸭肝脏组织的总RNA并反转录为cDNA；
(2)以β-Actin作为内参基因，并以年龄协同基因GSH或IGF为目标基因，定量分析检测出被鉴定个体的GSH相对△CT值或IGF相对△CT；
以及，定量分析检测出该组所述老鸭的GSH平均△CT值或IGF平均△CT值；
(3)将所述GSH相对△CT值减去所述GSH平均△CT值，得到被鉴定个体的GSH相对差值△△CT，并计算被鉴定个体的GSH基因相对表达量2-△△CT值，当GSH基因相对表达量2-△△CT值小于统计设定值A时，判断该被鉴定个体为1年以上的老鸭；
或者，将所述IGF相对△CT减去所述IGF平均△CT值，得到被鉴定个体的IGF相对差值△△CT，并计算被鉴定个体的IGF表达量2-△△CT值，当IGF表达量2-△△CT值小于统计设定值B时，判断该被鉴定个体为1年以上的老鸭。
2.如权利要求1所述的基于定量PCR鉴定老鸭的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述定量分析检测中，IGF的定量分析的引物序列为：
IGF F：5’-GGACATATGGAACGTGACA’-3；
IGF R：5’-CCAGATGAGGACAGGAGT’-3。
3.如权利要求1所述的基于定量PCR鉴定老鸭的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述定量分析检测中，GSH的定量分析的引物序列为：
GSH F：5’-TTGAGTGCTGCATCTCCGTT-3’；
GSH R：5’-GTCCACGTCCACTTCCATGT-3’。
4.如权利要求1所述的基于定量PCR鉴定老鸭的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述统计设定值A为1.55。
5.如权利要求1所述的基于定量PCR鉴定老鸭的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述统计设定值B为1.84。
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