[发明专利]聚酮合酶PreuA-TEPreu3 有效
| 申请号： | 202110989776.0 | 申请日： | 2021-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN113699130B | 公开（公告）日： | 2023-03-24 |
| 发明（设计）人： | 刘庆培;杨小龙;徐瑶;张丹 | 申请（专利权）人： | 中南民族大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/81;C12N1/19;C12P7/42;C07C51/47;C07C65/05;A01N37/40;A01P3/00;A61K31/192;A61P31/04;C12R1/865 |
| 代理公司： | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人： | 于洪;金耀生 |
| 地址： | 430072 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 聚酮合酶 preua te base sub preu3 | ||
1.聚酮合酶PreuA-TEPreu3，其特征在于，所述聚酮合酶PreuA-TEPreu3的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述聚酮合酶PreuA-TEPreu3的基因。
3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于，所述基因序列是SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
4.含有权利要求2或3所述的基因的重组载体。
5.一种用权利要求4所述重组载体转化得到的重组基因工程菌。
6.权利要求1所述的聚酮合酶PreuA-TEPreu3在制备苔色酸中的应用。
7.一株可高效生产苔色酸的酵母突变株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
采用LiAc/PEG4000介导的转化法利用权利要求4所述的重组载体转化酿酒酵母，将转化液均匀涂布于SC-Ura固体平板上，30℃培养箱中培养，即得到酵母突变株。
8.苔色酸的制备方法，采用权利要求7所述的构建方法构建的酵母突变株，其特征在于，包括如下步骤：
步骤（1），将酵母突变株接种于SC-Ura液体培养基中，30℃，摇床培养；培养的第2d，加入1%YPD培养基继续培养3-4d，得到发酵液；
其中，1%YPD培养基和SC-Ura液体培养基体积相同；
步骤（2），对步骤（1）培养得到的发酵液，用等体积的乙酸乙酯萃取，对萃取液浓缩，得到粗浸膏；
步骤（3），对步骤（2）得到的粗浸膏提纯，得到苔色酸。
9.根据权利要求8所述的苔色酸的制备方法，其特征在于：
步骤（3）中，对步骤（2）得到的粗浸膏进行提纯，提纯方法为：将粗浸膏用甲醇溶解后，通过ODS C18反相硅胶柱层析法，选用甲醇-水为流动相对粗浸膏进行梯度洗脱，共得到五个组分段Fr.A-Fr.E；目标代谢物苔色酸集中在Fr. E组分中，将Fr. E组分通过高效液相制备得到苔色酸；
其中，梯度洗脱流动相采用的甲醇：水的体积比依次为5:95、10:90、15:85、20:80、25:75，各梯度洗脱所用的流动相总体积均为SC-Ura液体培养基体积的十分之一。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中南民族大学，未经中南民族大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110989776.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种磁液挤压式发电模块
- 下一篇：一种关系图谱构建方法、系统、电子设备及介质
