[发明专利]一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法

说明书

本发明公开了一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，具体是利用HPLC‑MSMS分析法，分别建立白头翁皂苷B4、B5、D、A3、黑海常春藤皂苷A1、α‑常春藤皂苷、秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、黄柏碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱的标准曲线，测定煎煮法提取白头翁汤样品，制定标准曲线，测定13种化学成分的含量，为白头翁汤及其相关制剂的质量控制提供科学依据。

技术领域

本发明涉及中药技术领域，更具体的说是涉及一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法。

背景技术

中药处方中化学成分复杂、作用靶点多，处方药物的单煎和合煎有可能改变其化学成分，而各种化学成分的总和是其治疗效果的物质基础。因此，为研究中药处方的作用机制、弄清药效的物质基础，有必要研究其化学成分。

白头翁汤出自张仲景《伤寒论》，组方包括4味中药，其中君药为白头翁、臣药为黄连和黄柏、使药秦皮，具有清热解毒、凉血止痢之功效，兽医临床上常用来治疗痢疾和肠炎。根据现代临床研究表明，白头翁汤在抗炎、抗菌等方面有显著疗效。但是，白头翁汤的临床上应用并不广泛，仅其主药白头翁的活性成分—白头翁皂苷在临床上进行实际应用，具有抗炎作用。

因此，为了进一步研究白头翁汤的作用机制，促进白头翁汤在实际临床中的应用，需要研究其化学成分，测定其中有效成分的含量，即提供一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，具体是利用HPLC-MSMS分析法，分别建立白头翁皂苷B4、B5、D、A3、黑海常春藤皂苷A1、α-常春藤皂苷、秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、黄柏碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱的标准曲线，分别测定白头翁组、白头翁汤组和去白头翁组煎煮得到的三类样品的含量，比较其含量差异。测定13种化学成分的含量，为白头翁汤及其相关制剂的质量控制提供科学依据。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，包括如下步骤：

(1)称取对照品，然后加入甲醇中溶解，得到所述对照品储备液；

(2)取白头翁、黄柏、黄连和秦皮除杂、切碎，先加水浸泡并经初次加热至沸腾，然后经初次过滤分别得到滤渣和初次滤液，取所述滤渣加水经第二次加热至沸腾，再次过滤得到二次滤液，合并所述初次滤液和所述二次滤液后进行离心处理，取上清液稀释即得白头翁汤样品；

(3)取所述对照品储备液稀释得到对照品溶液，然后分别按照色谱条件和质谱条件、采用高效液相色谱-串联质谱进行检测，再最后以质量浓度为横坐标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，进行线性回归，得到相关系数和回归方程；

(4)取所述白头翁汤样品按照所述色谱条件和所述质谱条件采用高效液相色谱-串联质谱进行检测，然后根据步骤(3)得到的回归方程，分别进行计算，得到各化学成分含量。

上述优选技术方案的有益效果是：本发明公开的测定方法操作简单、准确度高、重复性好，能够同时测量白头翁汤中白头翁皂苷B4、B5、D、A3、黑海常春藤皂苷A1、α-常春藤皂苷、秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、黄柏碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱13中化学成分的具体含量，可以进一步完善白头翁汤的质量控制研究。

优选的，步骤(1)中所述对照品包括白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5、黑海常春藤皂苷A1、白头翁皂苷D、白头翁皂苷A3、α-常春藤皂苷、秦皮素、秦皮甲素、秦皮乙素、黄柏碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱和盐酸小檗碱。