[发明专利]一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法

权利要求书

1.一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)称取对照品，然后加入甲醇溶解，得到对照品储备液，所述对照品包括白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5、黑海常春藤皂苷A1、白头翁皂苷D、白头翁皂苷A3、α-常春藤皂苷、秦皮素、秦皮甲素、秦皮乙素、黄柏碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱和盐酸小檗碱；

(2)取白头翁、黄柏、黄连和秦皮除杂、切碎，先加水浸泡并经初次加热至沸腾，然后经初次过滤分别得到滤渣和初次滤液，取所述滤渣加水经第二次加热至沸腾，再次过滤得到二次滤液，合并所述初次滤液和所述二次滤液后进行离心处理，取上清液稀释即得白头翁汤样品；

(3)取所述对照品储备液稀释得到的对照品溶液，然后按照色谱条件和质谱条件、采用高效液相色谱-串联质谱进行检测，再最后以质量浓度为横坐标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，进行线性回归，得到相关系数和回归方程,所述色谱条件为：色谱柱采用BEHC18色谱柱，规格为2.1×50mm,1.7μm；流动相采用A相-B相，所述A相为甲醇，所述B相为0.1wt％的甲酸-水溶液，梯度洗脱方式为：0～0.5min采用10wt％甲醇，0.5～2min采用10wt％～90wt％甲醇，2～4min采用90％wt甲醇，4～6min采用90wt％～10wt％甲醇；梯度洗脱过程的体积流量0.2mL/min，柱温24.5℃，进样量为2.0μL；

(4)取所述白头翁汤样品按照步骤(3)所述色谱条件和所述质谱条件采用高效液相色谱-串联质谱进行检测，然后根据步骤(3)得到的回归方程，分别进行计算，得到各化学成分含量。

2.根据权利要求1所述的一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，其特征在于，所述对照品储备液中白头翁皂苷B4的质量浓度为28.2ng/mL、所述对照品储备液中白头翁皂苷B5的质量浓度为19.8ng/mL、所述对照品储备液中黑海常春藤皂苷A1的质量浓度为33ng/mL、所述对照品储备液中白头翁皂苷D的质量浓度为23ng/mL、所述对照品储备液中白头翁皂苷A3的质量浓度为20.8ng/mL、所述对照品储备液中α-常春藤皂苷的质量浓度为23.4ng/mL、所述对照品储备液中秦皮素的质量浓度为48ng/mL、所述对照品储备液中秦皮甲素的质量浓度为41ng/mL、所述对照品储备液中秦皮乙素的质量浓度为29.2ng/mL、所述对照品储备液中黄柏碱的质量浓度为22.4ng/mL、所述对照品储备液中盐酸巴马汀的质量浓度为27.8ng/mL、所述对照品储备液中盐酸黄连碱的质量浓度为21.4ng/mL、所述对照品储备液中盐酸小檗碱的质量浓度为32.2ng/mL。

3.根据权利要求2所述的一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述白头翁、所述黄柏、所述黄连和所述秦皮质量比为6:4.5:3:6；所述浸泡的加水量为10倍质量，所述浸泡的时间30min；所述一次加热至微沸后保持1h；所述二次加热前加水量为8倍质量，所述二次加热至微沸保持1h；所述离心的转速为12000rpm，时间为10min；所述稀释加入体积比为50％的甲醇，稀释至所述白头翁浓度为6g/mL、所述黄柏浓度为4.5g/mL、所述黄连浓度为3g/mL、所述秦皮浓度为6g/mL。

4.根据权利要求1所述的一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，其特征在于，所述质谱条件为：采用电喷雾电离离子源，毛细管电压为3.0kV，离子源温度为150℃，脱溶剂温为550℃，脱溶剂气体流速为1000L·h^-1，锥孔气流量50L·h^-1，检测模式为正负离子模式。

5.根据权利要求4所述的一种白头翁汤多组分化学成分含量测定方法，其特征在于，所述白头翁皂苷B4的回归方程为y＝12.164x+43.834，相关系数R²＝0.9957；

所述白头翁皂苷B5的回归方程为y＝73.834x-11.033，相关系数R²＝0.9970；

所述黑海常春藤皂苷A1的回归方程为y＝44.629x-55.865，相关系数R²＝0.9991；

所述白头翁皂苷D的回归方程为y＝6.9434x-49.337，相关系数R²＝0.9914；

所述白头翁皂苷A3的回归方程为y＝102.38x+192.54，相关系数R²＝0.9978；

所述α-常春藤皂苷的回归方程为y＝15.224x-65.522，相关系数R²＝0.9988；

所述秦皮素的回归方程为y＝618.24x+1195.6，相关系数R²＝0.9999；

所述秦皮甲素的回归方程为y＝1442.6x+6347，相关系数R²＝0.9978；

所述秦皮乙素的回归方程为y＝788.53x+2138.4，相关系数R²＝0.9978；

所述黄柏碱的回归方程为y＝386005x+1E+06，相关系数R²＝0.9903；

所述盐酸巴马汀的回归方程为y＝55528x+188470，相关系数R²＝0.9984；

所述盐酸黄连碱的回归方程为y＝79352x+239697，相关系数R²＝0.9980；

所述盐酸小檗碱的回归方程为y＝151735x+857480，相关系数R²＝0.9978。